[发明专利]一种在氨基磁珠表面共价偶联蛋白质的方法无效

专利信息
申请号: 200810115278.8 申请日: 2008-06-20
公开(公告)号: CN101348517A 公开(公告)日: 2009-01-21
发明(设计)人: 仝文斌;陈立杰;雷焱 申请(专利权)人: 北京倍爱康生物技术有限公司
主分类号: C07K1/10 分类号: C07K1/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 100070北*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 一种在氨基磁珠表面共价偶联蛋白质分子的方法,该法用不同的活化剂分别对氨基磁珠和蛋白质分子进行活化,之后将二者混合即可将蛋白质分子高效率共价偶联在磁珠表面。由于活化后蛋白质分子和磁珠具有不同的活化集团,彼此之间不会发生反应,从而有效的避免了蛋白质分子之间或磁珠之间的聚集现象。此外由于活化产生的巯基和马来酰亚胺活化集团之间的反应迅速高效,保证了该方法有很高的偶联效率和良好重复性。偶联后磁珠可广泛用于免疫检测,细胞分选等领域。
搜索关键词: 一种 氨基 表面 共价 蛋白质 方法
【主权项】:
1.一种在氨基磁珠表面共价偶联蛋白质的方法,其特征在于,实现步骤包括:(1)氨基磁珠的活化:混悬在磁珠活化缓冲液内磁珠表面的氨基(NH2-)与活化剂发生共价反应生成含马来酰亚胺的化学集团。(2)蛋白质的活化:溶解在蛋白质活化缓冲液内的蛋白质的氨基与活化剂发生共价反应生成巯基(SH-)。(3)偶联:活化磁珠和蛋白质在磁珠偶联缓冲液内混合后通过马来酰亚胺与巯基的共价反应蛋白质被共价偶联在磁珠表面。(4)稀释和保存:将偶联后磁珠用磁珠保存缓冲液稀释,4℃保存。(4)偶联效果检测:利用酶联免疫测定法原理检测偶联效果。
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