[发明专利]一种在氨基磁珠表面共价偶联蛋白质的方法无效
| 申请号： | 200810115278.8 | 申请日： | 2008-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN101348517A | 公开（公告）日： | 2009-01-21 |
| 发明（设计）人： | 仝文斌;陈立杰;雷焱 | 申请（专利权）人： | 北京倍爱康生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/10 | 分类号： | C07K1/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100070北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 氨基 表面 共价 蛋白质 方法 | ||
1.一种在氨基磁珠表面共价偶联蛋白质的方法，其特征在于，实现步骤包括：
(1)氨基磁珠的活化：混悬在磁珠活化缓冲液内磁珠表面的氨基(NH2-)与活化剂发生共价反应生成含马来酰亚胺的化学集团。
(2)蛋白质的活化：溶解在蛋白质活化缓冲液内的蛋白质的氨基与活化剂发生共价反应生成巯基(SH-)。
(3)偶联：活化磁珠和蛋白质在磁珠偶联缓冲液内混合后通过马来酰亚胺与巯基的共价反应蛋白质被共价偶联在磁珠表面。
(4)稀释和保存：将偶联后磁珠用磁珠保存缓冲液稀释，4℃保存。
(4)偶联效果检测：利用酶联免疫测定法原理检测偶联效果。
2.根据权利要求1所述的一种在氨基磁珠表面共价偶联蛋白质的方法，其特征在于，所述的氨基磁珠活化剂为Succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate(SMCC)或Sulfosuccinimidyl4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate(Sulfo-SMCC)。
3.根据权利要求1或2所述的氨基磁珠活化剂，其特征在于，活化剂SMCC或Sulfo-SMCC工作浓度为0.5～2mM。
4.根据权利要求1所述的一种在氨基磁珠表面共价偶联蛋白质的方法，其特征在于，所述的磁珠偶联效果检测方法为酶联免疫吸附试验(ELISA)或化学发光酶免疫检测法(CLIA)。
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