[发明专利]胎盘间充质干细胞分离和体外扩增培养方法无效
| 申请号： | 200810061267.6 | 申请日： | 2008-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN101270349A | 公开（公告）日： | 2008-09-24 |
| 发明（设计）人： | 王金福;袁文佶;石东燕 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N5/08 | 分类号： | C12N5/08;G01N33/53 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人： | 张法高;赵杭丽 |
| 地址： | 310027浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供一种胎盘间充质干细胞分离和体外扩增培养方法，采用收集胎盘母体侧蜕膜组织细胞后，先进行原代细胞的贴壁扩增，再行正、负向免疫分选结合的方法纯化胎盘间充质干细胞，获得CD34－CD105+细胞，在无血清体外培养体系中继代扩增培养。本发明方法每次只需少量原代细胞(1×105个细胞)就可以达到比较好的分选效果，可进一步提高了胎盘间充质干细胞的纯化率。所用培养体系不但对胎盘间充质干细胞具有明显的扩增优势，并且扩增的细胞具备多分化潜能。可在纯化胎盘间充质干细胞和体外扩增培养中应用。 | ||
| 搜索关键词： | 胎盘 间充质 干细胞 分离 体外 扩增 培养 方法 | ||
【主权项】：
1.一种胎盘间充质干细胞分离和体外扩增培养方法，通过以下方案实现：取胎盘母体侧蜕膜，剪碎后用0.1％IV型胶原酶消化并收集细胞，以含10％胎牛血清的DMEM培养基和2mML-谷氨酰胺进行贴壁培养，再行负、正向免疫分选结合的方法纯化胎盘间充质干细胞，获得CD34-CD105+细胞，再在体外无血清培养体系中继代扩增培养，其中所述负向纯化是行阴性免疫筛选，所述正向纯化是行阳性免疫筛选，所述无血清体外培养体系含有无血清培养基和成纤维细胞生长因子-2。
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