[发明专利]重组蛋白的变复性方法无效
| 申请号： | 200810033253.3 | 申请日： | 2008-01-30 |
| 公开（公告）号： | CN101220079A | 公开（公告）日： | 2008-07-16 |
| 发明（设计）人： | 王小宁;张颋;王菊芳;冯延叶;沈亚领;徐晓晶;金维荣;孔娟;杨忠 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学;华南理工大学;上海生物芯片有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C07K1/34 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人： | 徐迅 |
| 地址： | 20023*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，公开了一种从包涵体蛋白制备可溶性蛋白的方法。所述方法通过二次变性的过程，并且选择含精氨酸的碱性溶液作为第一次变性的变性剂，优选地以Triton辅助变性，从而最终蛋白的得率和纯度都远远高于单次变性的方法，且所获得的可溶性蛋白可良好地恢复天然态结构以及保持生物学活性。本发明的方法变性剂用量少，工作效率高，重组蛋白可以在先不经色谱纯化的条件下就达到较高的复性率，产品复性总收率在60％以上，工艺简单、产品收率高、成本低。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 蛋白 复性 方法 | ||
【主权项】：
1.一种从包涵体蛋白制备可溶性蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括：(a)用第一变性剂溶液溶解包涵体蛋白，从变性液中提取纯化出经一次变性的蛋白；其中，所述的第一变性剂溶液含精氨酸；(b)对(a)获得的经一次变性的蛋白进行二次变性，获得含有经二次变性的蛋白的变性液；和(c)对(b)获得的变性液进行复性，分离获得可溶性蛋白。
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