[发明专利]在油包水乳液中的微粒上的单分子PCR无效
申请号: | 200780026107.1 | 申请日: | 2007-06-19 |
公开(公告)号: | CN101506378A | 公开(公告)日: | 2009-08-12 |
发明(设计)人: | F·迪尔;K·W·金泽勒;B·沃戈尔斯腾 | 申请(专利权)人: | 约翰·霍普金斯大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C07H21/02 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 赵蓉民;路小龙 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 用于在珠子上扩增DNA的微乳液的油相粘度的调节增加了产物珠的同质性以及每个珠子扩增DNA的数量。此外,可以平行形成的分离的微乳液群的数量使用多孔板和被设计用于溶解生物样品的搅拌磨粉碎机得以增加。 | ||
搜索关键词: | 油包水 乳液 中的 微粒 分子 pcr | ||
【主权项】:
1. 一种用于分析核苷酸序列变异的方法,包括:形成微乳液,其包括油相和水相,其中所述水相包括一种或多种分析物DNA分子,其中所述水相占所述微乳液的10-30%(v/v)以及所述油相占所述微乳液的70-90%(v/v);其中所述油相包括:数量为所述油相的60-85%(v/v)的一种或多种低粘度烃,其具有在25℃下为20mPas以下的粘度;数量为10-30%(v/v)的一种或多种高粘度烃,其具有在25℃下大于20mPas的粘度;以及数量为5-10%(v/v)的乳化剂;在试剂珠存在下扩增所述微乳液中的分析物DNA分子,其中所述试剂珠与用于扩增所述分析物DNA分子的引物的多个分子结合,由此形成与一种分析物DNA分子的多个拷贝结合的产物珠;分离所述产物珠与未结合于所述产物珠的分析物DNA分子;测定与所述产物珠结合的所述一种分析物DNA分子的序列特征。
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