[发明专利]一种哺乳类精子头后部膜蛋白的分离方法及其应用

摘要

本发明公开了一种哺乳类精子头后部膜蛋白的分离方法及其应用。该方法包括如下步骤：1)制备顶体反应后精子头；2)将步骤1)制备的顶体反应后的精子头在pH为7.2－7.6、浓度为10－20mM的Tris·Cl和100μg/ml PMSF组成的低渗液中冰浴，然后离心回收得到低渗精子头；3)将步骤2)回收的低渗精子头在三去污裂解液中冰浴，然后离心回收上清液即得到精子头后部膜蛋白组分。本发明的精子顶体后部质膜蛋白在受精前后和胚胎发育过程均有特异的作用，无论在科学研究领域还是在避孕等实用领域都具有重要意义。

主权项

1.哺乳类精子头后部膜蛋白的分离方法，包括以下步骤：1)制备顶体反应后精子头；2)将步骤1)制备的顶体反应后的精子头在由pH为7.2-7.6、浓度为10-20mM的Tris·Cl和100μg/ml PMSF组成的低渗液中冰浴，然后离心回收得到低渗精子头；3)将步骤2)回收的低渗精子头在三去污裂解液中冰浴，然后离心回收上清液即得到哺乳类精子头后部膜蛋白；所述三去污裂解液含有pH为8.0、浓度为50mM的Tris·Cl，150mM NaCl，0.1g/100ml SDS，体积百分含量为1％NP-40，0.5g/100ml去氧胆酸钠，100μg/ml PMSF，1μg/ml Aprotinin和0.02g/100ml NaN3。