[发明专利]检测痕量过氧化氢的罗丹明S缔合物微粒酶催化荧光方法

摘要

本发明公开了一种检测痕量过氧化氢的罗丹明S缔合物微粒酶催化荧光方法，它是在弱酸性的HAc－NaAc溶液中加入KI、HRP、H₂O₂、罗丹明S，摇匀后定容得已知浓度的被测体系，然后用荧光光度计扫描得到体系的激发和发射光谱，在激发光波长500nm处和发射波长556nm处测得体系的荧光强度F和试剂空白F₀，计算ΔF＝F－F₀的值，再求出被测物的ΔF，再根据工作曲线计算出某未知浓度的被测物的H₂O₂浓度。这种方法反应条件温和，设备简单，操作简单，试剂易得、价廉，灵敏度高，选择性好，简便快速，易于推广应用。

主权项

1.检测痕量过氧化氢的罗丹明S缔合物微粒酶催化荧光方法，其特征是：测定方法包括步骤如下：(1)制备已知的H2O2浓度的测试体系，用微量取样器移取HAc-NaAc缓冲液于试管中；在上述试管的溶液中加入KI、辣根过氧化物酶(HRP)、已知不同浓度的H2O2、罗丹明S，摇匀，定容至3ml；(2)依照步骤(1)的方法制备试剂空白体系，不加入H2O2；(3)用荧光光度计扫描得到的体系的激发和发射荧光光谱，在激发光波长500nm，发射波长556nm处，测定体系的荧光强度为F和F0，计算ΔF＝F-F0的值；(4)根据ΔF对H2O2的浓度关系作工作曲线；(5)依照步骤(1)的方法制备检测体系，其中加入的H2O2为含有H2O2 但未知浓度的被测物，求出被测物的ΔF值；(6)依据(4)的标准曲线，计算出被测物的所含H2O2浓度。