[发明专利]检测痕量过氧化氢的罗丹明S缔合物微粒酶催化荧光方法

权利要求书

1.检测痕量过氧化氢的罗丹明S缔合物微粒酶催化荧光方法，其特征是：测定方法包括步骤如下：

(1)制备已知的H₂O₂浓度的测试体系，用微量取样器移取HAc-NaAc缓冲液于试管中；在上述试管的溶液中加入KI、辣根过氧化物酶(HRP)、已知不同浓度的H₂O₂、罗丹明S，摇匀，定容至3ml；

(2)依照步骤(1)的方法制备试剂空白体系，不加入H₂O₂；

(3)用荧光光度计扫描得到的体系的激发和发射荧光光谱，在激发光波长500nm，发射波长556nm处，测定体系的荧光强度为F和F₀，计算ΔF＝F-F₀的值；

(4)根据ΔF对H₂O₂的浓度关系作工作曲线；

(5)依照步骤(1)的方法制备检测体系，其中加入的H₂O₂为含有H₂O₂但未知浓度的被测物，求出被测物的ΔF值；

(6)依据(4)的标准曲线，计算出被测物的所含H₂O₂浓度。

2.如权利要求1所述的检测痕量过氧化氢的罗丹明S缔合物微粒酶催化荧光方法，其特征是：步骤(1)所述HAc-NaAc缓冲液的pH值为3.0-6.0，体积为0.05-1.0mL。

3.如权利要求1所述的检测痕量过氧化氢的罗丹明S缔合物微粒酶催化荧光方法，其特征是：步骤(1)所述的KI浓度为2×10^-3mol/L，体积为0.1-1mL。

4.如权利要求1所述的检测痕量过氧化氢的罗丹明S缔合物微粒酶催化荧光方法，其特征是：步骤(1)所述的HRP浓度为0.2μg/mL，体积为0.02-0.2mL。

5.如权利要求1所述的检测痕量过氧化氢的罗丹明S缔合物微粒酶催化荧光方法，其特征是：步骤(1)所述的罗丹明S浓度为2×10^-5mol/L，体积为0.1-0.8mL。

6.如权利要求1所述的检测痕量过氧化氢的罗丹明S缔合物微粒酶催化荧光方法，其特征是：在500nm处测定激光波长，在556nm处测定荧光波长。