[发明专利]重组α－葡聚糖酶融合蛋白高效生产方法及相关表达载体和菌株

摘要

本发明提供了一种重组α－葡聚糖酶融合蛋白高效生产方法，通过PCR方法获得编码油脂酵母α－葡聚糖酶的基因序列，将其构建入带有His Tag标签的毕赤酵母分泌表达载体，并转化毕赤酵母获得高表达菌株，通过优化的高密度发酵和纯化工艺，获得了高纯度的带有His Tag的α－葡聚糖酶融合蛋白，其具有高度的α－葡聚糖酶活。该方法工艺简便、高分泌表达α－葡聚糖酶融合蛋白，获得的α－葡聚糖酶融合蛋白纯度高、活性好、生产成本低。

主权项

1.一种高效生产α-葡聚糖酶融合蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：a.在适合的表达条件下，培养一酵母工程细胞，所述酵母工程细胞整合有内含编码所述α-葡聚糖酶融合蛋白的核苷酸序列的酵母分泌表达载体，所述核苷酸序列编码的蛋白包含SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列，从而分泌表达出所述α-葡聚糖酶融合蛋白；b.分离纯化出表达的所述α-葡聚糖酶融合蛋白。