[发明专利]通过PH操作将污染物与肺炎链球菌多糖分离

摘要

本发明描述一种在纯化之前降低复杂细胞肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)溶解产物肉汤中的蛋白质含量且保持其中的荚膜多糖含量的方法。细胞溶解后利用pH值的降低产生始终符合蛋白质规格的纯化多糖和纯化过程中的较高多糖回收产量。

主权项

1.一种在纯化之前降低复杂细胞肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)溶解产物肉汤中的蛋白质含量且保持其中荚膜多糖含量的方法，所述方法包含以下步骤：(a)使选定肺炎链球菌(S.pneumoniae)血清型在大豆基培养基中生长，其包括：(i)向含有所述大豆基培养基的第一个容器接种所述选定血清型的菌种储备物，且培育所述第一个容器直到生长要求得到满足，(ii)向含有所述大豆基培养基的第二个容器接种来自步骤(i)的培养物，同时在所述第二个容器中维持稳定的pH值和温度，和(b)用洗涤剂溶解步骤(a)中所产生的细菌细胞，从而产生含有可溶性蛋白质、细胞碎片、核酸和多糖的溶解产物；(c)搅拌所述细胞溶解产物历时足以确保完全溶解和多糖释放的时间；(d)将所述细胞溶解产物的pH值降低到小于5.5以使所述洗涤剂和大部分所述可溶性蛋白质沉淀析出；(e)在不搅拌的情况下将步骤(d)中所形成的溶液和沉淀保持历时足以使所述沉淀沉降的时间；和(f)通过离心和/或过滤加工所述溶液和沉淀，由此溶液中的所述荚膜多糖得以保留且所述可溶性蛋白质得以有效减少。