[发明专利]基于磁性纳米粒子的单核苷酸多态性(SNP)检测方法

摘要

本发明公开了一种利用磁性纳米粒子做为载体针对基因组中单核苷酸多态性(SNP)位点进行分型的方法，其特征在于将生物素标记的靶序列固定到亲合素标记的磁性纳米颗粒上，通过磁性纳米粒子－DNA复合体与等位基因特异探针杂交的方法，实现对样品的分型。该方法利用了磁性纳米粒子的优点，克服了现有技术中对待检测靶序列进行纯化、浓缩而导致的成本高、费时、费力等缺陷，从而具有简便、高效、准确地对大量样品进行SNP分型的优点。

主权项

1.一种基于磁性纳米粒子的单核苷酸多态性分型方法，包括下述步骤：(a)选取待检测功能SNP位点。设计一对扩增引物(一条标记生物素)和两条带有标记物的野生和突变检测探针。(b)通过PCR扩增出包含有待测SNP位点的靶序列，然后将其固定到亲合素包被的磁性纳米粒子上，构成磁性纳米粒子-DNA复合物。(c)磁性纳米粒子-DNA复合物变性后，与两条等位基因特异性探针杂交。通过控制杂交温度，使野生纯合型样本只与野生探针匹配，突变纯合型样本只与突变探针匹配，杂合型样本与两种探针均匹配。(d)将杂交有检测探针的磁性纳米粒子经洗涤、变性、磁分离后，通过检测变性下来探针上的标记物来实现对样本的SNP分型。