[发明专利]制备阿霉素的方法无效
| 申请号： | 99805400.3 | 申请日： | 1999-04-22 |
| 公开（公告）号： | CN1298453A | 公开（公告）日： | 2001-06-06 |
| 发明（设计）人： | A·I·索拉瑞;G·扎诺索;S·费利皮尼;F·陶缇;S·欧特恩;A·L·库罗姆博;C·R·哈啻尼森 | 申请（专利权）人： | 法玛西雅厄普约翰公司 |
| 主分类号： | C12P19/56 | 分类号： | C12P19/56;C12N15/31;C12N15/53;C12N15/63;C12N15/74;C12N15/76 |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人： | 郭建新 |
| 地址： | 意大*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 制备 阿霉素 方法 | ||
1．一种DNA分子，它包含：一个含有编码柔红霉素14-羟化酶的基因doxA的DNA区和一个含有至少一种赋予柔红霉素和阿霉素抗性的基因的DNA区。
2．权利要求1的DNA分子，它进一步包含一种强启动子。
3．权利要求2的DNA分子，其中，所述强启动子是ermE*。
4．权利要求1的DNA分子，其中，所述赋予柔红霉素和阿霉素抗性的基因选自drrA、drrB和drrC基因及其任意混合物。
5．权利要求4的DNA分子，其中，所述赋予柔红霉素和阿霉素抗性的基因是drrA和drrB基因。
6．权利要求4的DNA分子，其中，所述赋予柔红霉素和阿霉素抗性的基因是drrA、drrB和drrC基因。
7．权利要求1的DNA分子，其中，包含编码柔红霉素14-羟化酶的基因doxA的区的长度是2.9kb。
8．权利要求7的DNA分子，其中，包含基因doxA的片段相应于包含doxA核苷酸序列的KpnⅠ-BamHⅠ片段。
9．权利要求5的DNA分子，其中，包含所述drrA和drrB基因的所述区是2.3kb XbaⅠ-HindⅢ DNA片段。
10．权利要求1的DNA分子，其中，所述赋予柔红霉素和阿霉素抗性的基因与选自drrA、drrB和drrC基因的基因至少是80％相同的。
11．一种包含权利要求1的DNA分子的载体。
12．权利要求11的载体，其中，所述载体是质粒。
13．权利要求12的质粒，其中，所述质粒选自pIS284和pIS287。
14．一种用权利要求11的载体转化的或转染的宿主细胞。
15．权利要求14的宿主细胞，其中，所述宿主细胞不生产柔红霉素。
16．权利要求14的宿主细胞，其中，所述宿主细胞是生产柔红霉素的细菌细胞。
17．权利要求14的重组宿主细胞，其中，所述宿主细胞是链霉菌属细胞。
18．一种用于将柔红霉素生物转化成阿霉素的方法，它包括如下步骤：
在含有柔红霉素的培养基中培养一种重组宿主细胞，其中，
所述宿主细胞包含一种DNA分子，该DNA分子包含一个含有编码
柔红霉素14-羟化酶的基因doxA的DNA区和一个含有至少一种赋
予柔红霉素和阿霉素抗性的基因的DNA区，其中，所述宿主细胞
不生产柔红霉素，以及
从所述培养基分离任何生成的阿霉素。
19．一种通过发酵生产阿霉素的方法，它包括如下步骤：
在培养基中培养一种重组宿主细胞，其中，所述宿主细胞包含一种DNA分子，该DNA分子包含一个含有编码柔红霉素14-羟化酶的基因doxA的DNA区和一个含有一种或多种赋予柔红霉素和阿霉素抗性的基因的DNA区，其中，所述宿主细胞是生产柔红霉素的细菌细胞，以及
从所述培养基分离任何生成的阿霉素。
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