[发明专利]抗癌新药粉萆解总皂甙的制备方法

说明书

本发明步及医药技术领域，确切地说它是一种抗癌新药粉草解总皂甙的制备方法。

粉草解为薯蓣科薯蓣属植物粉背薯蓣(Dioscorea collettii var.hypoglauca)的干燥块茎，主产于我国的浙江、江西等华东地区，能祛风、利湿，主治风湿顽痹、腰膝疼痛、小便不利、淋浊、遗精、湿热疮毒等症[江苏新医学院编，中药大辞典(1997年，上海人民出版社)，pp.2001-2004]。在民间，粉草解常与其他中草药配伍，用来治疗子宫颈癌[王冰主编，抗癌中药方选(1992年，人民军医出版社)，pp.185-187]和膀胱肿瘤[王冰主编，抗癌中药方选(1992年，人民军医出版社)，pp.210-211]。《中华人民共和国药典》的1985版[中华人民共和国卫生部药典委员会编，中华人民共和国药典1985版一部(1985，人民卫生出版社、化学工业出版社)，p.259]、1990版[中华人民共和国卫生部药典委员会编，中华人民共和国药典1990版一部(1990，人民卫生出版社、化学工业出版社)，pp.262-263]和1995版[中华人民共和国卫生部药典委员会编，中华人民共和国药典1995版一部(1995，广东科技出版社、化学工业出版社)，pp.260-261]均将粉草解作为中药材收入其中。然而迄今为止，对中药粉草解的研究甚少。娄伟、唐世蓉等人在对其化学成分研究中，分别从中分离得到9个甾体皂甙元[娄伟等，云南植物研究1984，26，461-462]以及4个甾体皂甙[唐世蓉等，植物学报1984，26，419-424；唐世蓉等，植物学报1986，28，453-456]。除此之外，未见任何有关粉草解的药理活性报道，尤其是没有系统全面的抗癌活性报道，其抗癌有效部位尚未清楚。本发明人在寻找中草药抗癌活性成份过程中，发现粉草解的总皂甙具有很好的抗肿瘤活性，并且从总皂甙活性部位中获得多个具有抗癌活性甾体皂甙类化合物。

本发明的目的是提供一种具有抗癌功能的抗癌新药粉草解总皂甙的制备方法，不但开发了粉草草解的抗癌新用途，而且提供了简单实用的工艺路线。

本发明是这样实现的：以中药粉草解或者新鲜采集的粉草解为原料，采用溶剂提取法、溶剂萃取法、树脂吸附法、正相柱层析法、反相柱层析法等工艺中的一种或者多种工艺，并结合浓缩干燥、冷冻干燥、喷雾干燥等常用干燥方法制备成粉草解总皂甙。将制成的粉草解总皂甙作为抗癌活性成分，使之与适宜的赋形剂相结合，按照常规方法制成散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、栓剂、肠溶剂、注射剂、糖浆剂、乳剂、混悬剂、酊剂、膏剂、喷雾剂等剂型，用于治疗包括肺癌、白血病、膀胱癌、乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、肝癌、皮肤癌、前列腺癌、鼻咽癌、绒毛膜上皮癌、肾脏肿瘤、胃癌、直肠癌、子宫癌、口腔癌、食道癌、胆癌、胆道癌、胆管癌、胰腺癌、骨癌、喉癌、舌癌、胸腺癌、淋巴瘤、恶性甲状腺肿瘤、脑肿瘤、中枢神经系统肿瘤、纵隔肿瘤、黑色素瘤、肉瘤在内的等多种癌症疾病。

所采用的溶剂提取法中，可选用水、甲醇、乙醇、正丁醇或者其他低级脂肪醇中的一种溶媒，也可选用其中的任意两种或多种溶剂以任意比例所组成的混合溶媒，在室温上浸润提取或者用超声波振荡仪超声振荡提取，或者在加热状态下浸润提取或回流提取。提取次数可以是一次，也可以是多次。

所采用的溶剂萃取法中，可将经水或者低级脂肪醇中的一种溶媒或者混合溶媒提取所获得的提取物混悬于水中，用正丁醇或含水正丁醇直接进行萃取，或者经低极性溶媒(如石油醚、二氯甲烷、三氯甲烷等中的一种或多种)脱脂后，再用正丁醇或含水正丁醇进行萃取。萃取次数可以是一次，也可以是多次。

所采用的树脂吸附法中，树脂可选用D-101型吸附树脂、XAD-2型吸附树脂或者CHP-20P型吸附树脂以及其他类型的吸附树脂，洗脱溶媒用水、甲醇、乙醇、丙酮、含水甲醇、含水乙醇或者含水丙酮中的一种或多种。洗脱时可以浓度洗脱，也可以梯度洗脱。

所采用的正相柱层析法中，可选用常压或加压硅胶柱层析，所用柱填料可选柱层析用硅胶或者薄层层析用硅胶，洗脱剂可选用苯/丙酮、二氯甲烷/丙酮、三氯甲烷/丙酮、苯/甲醇、二氯甲烷/甲醇、三氯甲烷/甲醇、乙酸乙酯/甲醇、苯/丙酮/水、二氯甲烷/丙酮/水、三氯甲烷/丙酮/水、二氯甲烷/甲醇/水、三氯甲烷/甲醇/水或者乙酸乙酯/甲醇/水等中溶媒的一种或者多种。洗脱时可以等浓度洗脱，也可以梯度洗脱。

所采用的反相柱层析法，可选用常压或加压反相柱层析，所用柱填料可选十八烷基键合相(ODS)或八烷基键合相，洗脱剂用含水甲醇或含水乙腈。洗脱时可以等浓度洗脱，也可以梯度洗脱。