[发明专利]蛋白酶变体及组合物

权利要求书

1.在洗涤剂中具有改良的洗涤性能的枯草杆菌酶变体，其在位点95、97和/或98(BASBPN编号)具有修饰。

2.在洗涤剂中具有改良的洗涤性能的枯草杆菌酶变体，其含有选自下组的至少一种修饰(BASBPN编号)：

    95T+97T+98E

    97E+98V或

在上述任何变体中包含一个或多个保守修饰的变体(如97E(酸性氨基酸)+98V变体的保守修饰包括如97D(酸性氨基酸)+98V之类变体)。

3.根据权利要求2的枯草杆菌酶变体，其中所述修饰选自下组(BASBPN编号)：

    V95T+G97T+A98E

    G97E+A98V或

在上述任何变体中包含一个或多个保守修饰的变体(如G97E(酸性氨基酸)+A98V变体的保守修饰包括如G97D(酸性氨基酸)+A98V之类变体)。

4.权利要求1-3中任何一项的变体，其中亲本枯草杆菌酶选自I-S1亚组。

5.权利要求4的变体，其中亲本枯草杆菌酶选自ABSS168、BASBPN、BSSDY和BLSCAR或其保留了I-S1亚组特征的功能性变体。

6.权利要求1-3中任何一项的变体，其中亲本枯草杆菌酶选自I-S2亚组。

7.权利要求6的变体，其中亲本枯草杆菌酶选自BLS147、BLS309、BAPB92、TVTHER和BYSYAB或其保留了I-S2亚组特征的功能性变体。

8.上述权利要求中任何一项的变体，其中所述修饰是与任何其它位点处的一个或多个修饰组合的。

9.权利要求8的变体，其中所述修饰是与27、36、57、76、97、101、104、120、123、167、170、206、218、222、224、235和274位中的一个或多个位点处的修饰组合的。

10.权利要求9的变体，其中所述枯草杆菌酶属于I-S2亚组而且所述进一步改变选自K27R、^*36D、S57P、N76D、G97N、S101G、V104A、V104N、V104Y、H120D、N123S、Y167A、Y167I、R170S、R170L、R170N、Q206E、N218S、M222S、M222A、T224S、K235L和T274A。

11.权利要求10的变体，其包含有V104N+S101G、K27R+V104Y+N123S+T274A或N76D+V104A或者这些突变(V104N、S101G、K27R、V104Y、N123S、T274A、N76D、V104A)的其它组合中的任何一种变异，还包含有权利要求1-10中任何一项提及的任何一个或多个取代、删除和/或插入。

12.上述权利要求中任何一项的枯草杆菌酶变体，其中所述修饰是与129、131、133和194位中一个或多个位点处的修饰组合的。

13.权利要求12的变体，其中所述枯草杆菌酶属于I-S2亚组而且所述进一步改变选自P129K、P131H、A133P、A133D和A194P。

14.编码权利要求1-13中任何一项的枯草杆菌酶变体的分离DNA序列。

15.含有权利要求14的分离DNA序列的表达载体。

16.转化了权利要求15的表达载体的微生物宿主细胞。

17.权利要求16的微生物宿主，它是细菌，优选芽孢杆菌，尤其是迟缓芽孢杆菌。

18.权利要求16的微生物宿主，它是真菌或酵母，优选丝状真菌，尤其是曲霉。

19.生产权利要求1-13中任何一项的变体的方法，其中将权利要求16-18中任何一项的宿主在有利于表达和分泌所述变体的条件下培养，并回收变体。

20.含有权利要求1-13中任何一项的枯草杆菌酶变体的组合物。

21.根据权利要求20的组合物，其中还含有纤维素酶、脂肪酶、角质酶、氧化还原酶、另一种蛋白酶或淀粉酶。