[发明专利]用于鉴定选择性抑制丙型肝炎病毒复制的试剂的新筛选方法

权利要求书

1.一种筛选潜在的新型抗病毒剂的方法，这种抗病毒剂能够有效抑制  包含干扰素敏感决定部位(ISDR)的病毒蛋白的活性，该方法包括：

培养含PKR蛋白激酶、病毒蛋白和待测试剂的混合物；以及测量PKR蛋白酶活性；与缺乏待测试剂时PKR蛋白酶活性相比较。

2.权利要求1的方法，其中抗病毒试剂抑制丙型肝炎病毒复制。

3.权利要求1的方法，其中病毒蛋白为NS5A。

4.一种筛选潜在的抗病毒剂的方法，该抗病毒剂能有效抑制包含ISDR的病毒蛋白与干扰素诱导的PKR蛋白激酶间的直接相互作用，包括：

培养含ISDR的蛋白，PKR蛋白激酶和待测试剂的混合物；以及测量含ISDR的蛋白与PKR蛋白间的结合；并与在缺少待测试剂时结合的程度进行比较。

5.权利要求4的方法，其中病毒蛋白为NS5A。

6.权利要求4的方法，其中抗病毒剂抑制丙型肝炎病毒复制。

7.权利要求1的方法，其中在遗传工程化酵母细胞中表达PKR蛋白激酶和含ISDR的蛋白，以增加在活化的PKR蛋白激酶存在下报告基因的表达；并进一步包括在存在和不存在待测试剂的情况下测量报告基因表达水平的步骤。

8.权利要求7的方法，其中报告基因融合至GCN4/β-gal蛋白。

9.一种用于筛选抗病毒剂的酵母细胞，它经遗传工程化表达：

(a)含ISDR区的多肽，和

(b)干扰素诱导的PKR蛋白激酶，和

(c)报告基因，其表达因PKR蛋白激酶的活化而增加。

10.权利要求9中的酵母细胞，其中含ISDR区的多肽为NS5A。

11.权利要求10中的酵母细胞，其中报告基因是融合的GCN4/β-gal基因。

12.一种抑制丙型肝炎病毒(HCV)在HCV感染的细胞中复制的方法，包括施用有效数量，干扰在所述细胞中NS5A和PKR间的相互作用的药剂。

13.权利要求13的方法，其中药剂为NS5A抑制剂。

14.权利要求14的方法，其中试剂为与ISDR互补的反义分子。