[发明专利]细胞培养系统

说明书

本发明涉及用于细胞培养技术的底物和容器。特别地，本发明涉及细胞可以在其上生长用以接下来转移到需要细胞层的患者的底物。

WO 91/13638描述了一种伤口敷料，它包括一聚合物层，具有锚定到一个表面的经培养的哺乳动物细胞层。这样的敷料适宜用于部分厚度伤口的处理，例如烧伤和供皮位置。这些细胞优选是可以从通过活组织切除获得的自体固有皮细胞培养或者从其它来源培养的上皮细胞。在细胞所粘附的聚合物底物存在下它们经过培养和生长。当把该底物涂敷到患者的备置位置时，细胞从底物转移到患者身上，并连续繁殖形成上皮细胞层。所述的敷料的制备如下：通过与聚合敷料底物表面接触培养细胞；从培养基移去底物；然后将敷料涂于患者以便细胞接触患者创伤面。

本发明的一个目的在于提供一种改进形式的细胞培养底物装置，该装置方便用于细胞培养和将细胞锚定到底物上，并接下来将细胞转移到患者。本发明的另一个目的是提供一种同样可以实现上述目的的细胞培养系统。

根据本发明，细胞培养底物装置包括由对细胞无毒性或低毒性的物质形成的框架和对细胞没有毒性且至少有一细胞可以粘附在其上的表面的细胞培养底物，所述框架适合以可释放地以适当构型固定所述细胞培养底物，以将细胞粘附在所述至少一个表面。

该框架最好具有适宜形状和大小以适合细胞培养容器。尽管其它形状同样适合，但是优选形式一般是正方形、矩形或圆形。

该框架适合以适当构型固定细胞培养底物用以将细胞粘附到其表面上。细胞培养底物优选包括具有适宜细胞粘附的表面的聚合物膜。该膜可以是亲水的，也可以是疏水的。该底物可以包括一层以上的物料。

适宜的细胞培养底物包括WO 91/13638中提到的那些，即聚酯、聚丙烯、醋酸乙烯酯的掺合物或共聚物，例如乙烯-醋酸乙烯酯共聚物、聚偏二氯乙烯、聚苯乙烯、聚丁二烯、聚乙烯、离聚物，例如SURLYN(商标)，或含这些化合物的共聚物和掺合物。

例如亲水聚氨酯的亲水聚合物也可以形成培养底物。该培养底物具有经培养的哺乳动物细胞可以粘附在其上的第一表面。该表面可以经处理以改进其性能，如用例如胶原基物料的另一物质涂敷，或通过其它方式，例如电晕放电或等离子处理。该底物优选是聚合物膜。优选该底物与体外形可贴合。该底物可以是连续的，也可以是有孔眼的。

细胞培养底物优选适宜用于创伤，以作为伤口敷料。因此细胞培养底物优选是可贴合并有弹性，以便与它所涂敷的伤口外形一致。该物料可以是适宜于吸入的。当细胞培养底物具有粘附到其表面的上皮细胞时，可将其涂敷到伤口上，以便细胞与伤口接触，以有效地将细胞从底物转移到伤口以促进伤口上皮再形成。

当底物包括例如聚合物膜的平面物质时，该框架优选适合以基本上平的构型固定底物。以这种方式可以将细胞在底物上的汇聚减到最小，以便细胞可以相对均匀地分布到它们粘附的表面上。因此该框架优选包括平面部分，该平面部分接合至少部分所述细胞培养底物，在与所述平面部分呈平行的平面上以平面构型可释放地固定底物。该平面部分可以包括开式框架或物料的连续层。在优选形式中，该平面部分包括开式框架，该开式框架具有周边即闭式带的细胞培养底物可以粘附在其上的框架。

该细胞培养底物可以通过例如粘合、层压、加热或射频熔接或例如夹的机械方式以可释放地固定到框架上。框架和细胞培养底物之间的结合优选不漏液的。该框架也可用于相对可以是容器或细胞培养容器内表面的另一表面去压部分或全部底物以将底物保持为平的构型。

该框架还可以包括围绕所述平面部分的可以或不可以连续延伸的直立壁。该壁可以包括将所述框架保持在容器内的部件。例如，该壁可以包括可以接合例如培养皿或细胞培养容器的容器的边缘的口缘或凹口。优选该壁与框架的其它部分为一整体。当壁为连续且包围框架的平面部分，并且细胞培养底物与框架结合时，框架和底物可以一起形成细胞可以在其中培养的容器。

框架由对细胞无毒性或没有明显毒性的物料制成。适宜物料包括聚酯(例如聚对苯二甲酸乙二酯、聚萘二甲酸乙二酯)，包括它们的掺合物和共聚物、聚烯烃、聚苯乙烯、聚碳酸酯、丙烯酸物质、聚醚酰亚胺、乙烯-醋酸乙烯酯共聚物以及含任意这些物质的掺合物和共聚物或其它适宜物质。该框架可以通过模制制成，例如吹塑、热成型、真空或加压成型或注模。该框架可以由聚合物膜通过真空成型和加热以形成所需形状。