[发明专利]一种制备β－内酰胺抗生素的方法

权利要求书

1．一种制备β-内酰胺抗生素的方法，其中一种N-取代的β-内酰胺具有如分子式(Ⅰ)所示的通式结构其中R₀是H或C_1-3烷氧基；Y是CH₂、O、S、或S的一种氧化形式；Z是：其中，R₁是H，羟基，卤素，C_1-3烷氧基，选择性地取代的、选择性地含有一个或多个杂原子、饱和或不饱和的、支链或直链的C_1-5烷基，优选为甲基，选择性地取代的、选择性地含有一个或多个杂原子的C_5-8环烷基，选择性地取代的芳基或芳杂环，或选择性地取代的苄基；且X是(CH₂)_m-A-(CH₂)_n，其中m和n相同或不同，且应为0、1、2、3或4的整数之一，且A是CH=CH、C≡C、CHB、C=O、选择性地取代的N、O、S或S的选择性地氧化形式，同时B是H、卤素、羟基、C_1-3烷氧基或选择性地取代的甲基，

或者该N-取代的β-内酰胺的盐的形式，其与至少一种二羧酸酰基转移酶或其同工酶接触，并且在至少一种青霉素酰基转移酶或其同工酶存在下与一种前体物质反应以得到β-内酰胺抗生素的一种侧链。

2．如权利要求1的一种方法，其中没有中间体产物被分离和/或纯化。

3．如权利要求2的一种方法，该方法按“一罐法”进行。

4．如上述任何一个权利要求的一种方法，其中该N-取代的β-内酰胺为N-戊二酰基、N-琥珀酰基、N-己二酰基、N-3-(羧甲基硫代)丙酰基、N-反式-β-氢化己二烯二酰基、N-庚二酰基或N-3,3’-硫代二丙酰基β-内酰胺，或这些物质的盐的形式。

5．如上述任何一个权利要求的一种方法，其中该N-取代的β-内酰胺为N-取代的6-氨基青霉烷酸(6-APA)、7-氨基头孢烷酸(7-ACA)、3-氯-7-氨基去乙酸基去甲基头孢烷酸(7-ACCA)、7-氨基去乙酰基头孢烷酸(7-ADAC)、7-氨基去乙酸基头孢烷酸(7-ADCA)，或者它们的盐的形式。

6．如上述任何一个权利要求的一种方法，其中该β-内酰胺抗生素的侧链前体物质为D-(-)-苯基甘氨酸、D-(-)-4-羟基苯基甘氨酸、D-(-)-2,5-二氢化苯基甘氨酸、2-噻吩基乙酸、2-(2-氨基-4-噻唑基)-2-甲氧基亚氨基乙酸、α-(4-吡啶基硫代)乙酸、3-噻吩丙二酸或2-氰基乙酸，或者它们的酰胺或酯的形式。

7．如上述任何一个权利要求的一种方法，其中二羧酸酰基转移酶获自产碱菌属、节杆菌属、无色杆菌属、黑曲霉属、不动杆菌属、芽孢杆菌属或假单胞菌属的菌株。

8．如上述任何一个权利要求的一种方法，其中青霉素酰基转移酶获自醋杆菌属、气单胞菌属、产碱杆菌属、Aphanocladium、芽孢杆菌属、头孢属、埃希氏菌属、黄杆菌属、克吕沃尔氏菌属、不动菌属、精朊杆菌属、普罗威登斯菌属、假单胞菌属或黄单胞菌属的菌株。

9．如上述任何一个权利要求的一种方法，其中通过一种酶学方法由一种发酵产物起始得到该N-取代的β-内酰胺。

10．如权利要求9的一种方法，其中发酵产物可以是青霉素G、青霉素V、头孢菌素C、己二酰基-7-ADCA、3-羧基乙基硫代丙酰基-7-ADCA、2-羧基乙基硫代乙酰基-7-ADCA和3-羧基乙基硫代丙酰基-7-ADCA、己二酰基-7-ACA、3-羧基乙基硫代丙酰基-7ACA，2-羧基乙基硫代乙酰基-7-ACA和3-羧基乙基硫代丙酰基-7-ACA。

11．二羧酸酰基转移酶和青霉素酰基转移酶使一种N-取代的β-内酰胺转化为一种β-内酰胺抗生素的用途。