[发明专利]用于制备核黄素的单细胞或多细胞生物体

权利要求书

1、用于在生物技术中制备核黄素的单细胞或多细胞生物体，特别是微生物，其特征在于，该生物体具有这样改变的甘氨酸物质代谢，以致在无外加的甘氨酸下它的核黄素合成效率至少与野生型的棉桃阿舒氏囊霉菌属ATCC10895的核黄素合成效率相同，其中野生型的棉桃阿舒氏囊霉菌属ATCC10895是在标准条件下在加入6克/升的额外甘氨酸下培养的。

2、根据权利要求1的单细胞和多细胞生物体，其特征在于，在该生物体存在下，提高了甘氨酸的合成和/或甘氨酸的细胞内分解和/或甘氨酸从细胞中的输出至少部分被抑制。

3、根据权利要求1或2的单细胞或多细胞生物体，其特征在于，其具有提高的苏氨酸醛缩酶活性。

4、根据权利要求1至3之一的单细胞或多细胞生物体，其特征在于，其中至少部分抑制由甘氨酸形成细胞内丝氨酸。

5、根据权利要求4的单细胞或多细胞生物体，其特征在于，其中至少部分抑制丝氨酸羟基甲基转移酶活性。

6、根据权利要求4或5的单细胞或多细胞生物体，其特征在于，它们对甘氨酸抗代谢物具有抗性。

7、根据权利要求6的单细胞或多细胞生物体，其特征在于，它们是抗α-氨基甲基膦酸或α-氨基磺酸，β-羟基-正缬氨酸和/或其它苏氨酸和/或赖氨酸类似物的。

8、根据权利要求1至7之一的单细胞或多细胞生物体，其特征在于，它们是真菌，优选来自阿舒氏囊霉菌属的真菌。

9、根据权利要求1至8之一的单细胞或多细胞生物体，其特征在于，它们是棉桃阿舒氏囊霉菌属的真菌。

10、具有附图2b中给出的氨基酸序列和等位基因变异编码的核苷酸序列的苏氨酸醛缩酶基因。

11、根据权利要求10的苏氨酸醛缩酶基因，它们具有附图2b的核苷酸1至1149的核苷酸的核苷酸序列或基本上起相同作用的DNA序列。

12、根据权利要求10或11的苏氨酸醛缩酶基因，它们具有前接的附图2b的核苷酸-1231至1的核苷酸的核苷酸序列或基本上起相同作用的DNA序列的前接启动子。

13、根据权利要求10至12之一的苏氨酸醛缩酶基因，它们具有对应的可调节的基因序列。

14、包括权利要求10至13之一的苏氨酸醛缩酶基因的基因结构。

15、包括权利要求10至13的苏氨酸醛缩酶基因或权利要求14的基因结构的载体。

16、用于制备核黄素的转化生物体，它们包括权利要求10至13之一的可复制型的苏氨酸醛缩酶基因或权利要求14的基因结构。

17、根据权利要求16的转化生物体，它们包括权利要求15的载体。

18、制备核黄素的方法，其特征在于使用权利要求1至9的生物体。

19、制备产生核黄素的单细胞或多细胞生物体的方法，其特征在于，这样改变该生物体，即使该生物体具有这样改变的甘氨酸物质代谢，以致在无外加的甘氨酸下它的核黄素合成效率至少与野生型的棉桃阿舒氏囊霉菌属ATCC10895的核黄素合成效率相同，其中野生型的棉桃阿舒氏囊霉菌属ATCC10895是在标准条件下在加入6克/升的额外甘氨酸下培养的。

20、根据权利要求19的方法，其特征在于，借助于基因技术方法进行生物体的改变。

21、根据权利要求19或20的方法，其特征在于，通过启动子的交换和/或基因拷贝数目的提高来实现生物体的改变。

22、根据权利要求19至21之一的方法，其特征在于，通过内苏氨酸醛缩酶基因的改变产生具有高活性的酶。

23、根据权利要求19至22的方法，其特征在于，通过内丝氨酸羟基甲基转移酶的改变来至少部分地抑制丝氨酸羟基甲基转移酶的活性。

24、权利要求1至9以及16和17之一的生物体的用途，用于制备核黄素。

25、权利要求10至13之一的苏氨酸醛缩酶基因和权利要求14的基因结构的用途，用于制备权利要求1至9以及16和17之一的生物体。

26、权利要求15的载体的应用，其用于制备权利要求1至9以及16和17的生物体。