[发明专利]RNA循环逆转录反应方法无效
| 申请号： | 98121932.2 | 申请日： | 1998-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN1063790C | 公开（公告）日： | 2001-03-28 |
| 发明（设计）人： | 毛裕民;陈燃;唐榕 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 复旦大学专利事务所 | 代理人： | 陆飞 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | rna 循环 逆转录 反应 方法 | ||
【权利要求书】：
1、一种RNA循环逆转录反应方法，其特征在于，反应物在热循环仪上进行热变性、复性、延伸3个步骤的循环反应过程，每个循环过程控制各步骤的温度和时间参数为：
变性，温度条件：89-95℃，保温时间：5-120秒：
复性，温度条件：55-68℃，保温时间：5-90秒；
延伸，温度条件：60-70℃，保温时间：60-180秒。
2、根据权利要求1的所述RNA循环逆转录反应方法，其特征在于逆转录反应物组份为：
Tris-HCl pH7.9-9.1，15-50mmol/L；(NH4)2SO45-25mmol/L；MnCl21.0-5.0mmol/L；dNTP0.5mmol/L；DTT1mmol/L；明胶0.1mg/ml；RT引物1.25μmol/L；FD酶0.5-3U；RNA模板。
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