[发明专利]一种无糖箱式植物组织的培养方法

权利要求书

1．一种无糖箱式植物组织的培养方法，包括①制作培养容器；②培养环境的调控；③配制培养基；④消毒；⑤无糖培养，其特征在于：①培养容器为箱体式；②配制培养基所用的MS培养液不添加糖、有机物和维生素；③将二氧化碳输入培养箱。

2．按照权利要求1的方法，其中所述的培养容器是采用有机玻璃制作培养箱，有机玻璃的厚度可为3～5毫米，箱体的尺寸：长×高×宽=500～1000毫米×200～250毫米×500毫米。

3．按照权利要求1的方法，其中所述的无糖MS培养液进一步配制成增殖培养液，其配方(单位：毫克/升)为：MS(不加糖、有机物和维生素)+(0～0.5)6-苄基氨基嘌呤；进一步配制生根培养液，其配方为(单位：毫克/升)MS(不加糖、有机物和维生素)+(0～0.1)萘乙酸+(0～5000)活性碳。

4．按照权利要求1的方法，其中所述的培养基的基质可为琼脂或珍珠岩或砂或蛭石。

5．按照权利要求4的方法，其中所述的培养基的制作程序为：①按配方将培养液配制好；②如选择琼脂作为培养基质，可将琼脂溶解后加入培养液，经消毒后，放入培养箱内待用；③如选择珍珠岩或砂或蛭石作基质时，则需要分别消毒，再把培养液加入基质中待用。

6．按照权利要求1的方法，其中所述的消毒包括：①培养室消毒：称量6克高锰酸钾放入一个容器内，再加10毫升甲醛进行熏蒸，紫外灯照射；②培养箱消毒：先把培养箱清洗干净后，用75％的乙醇进行箱体内壁擦拭消毒，然后再使用6克高锰酸钾和10毫升甲醛进行熏蒸消毒；③培养基消毒：培养液十琼脂：经120℃,20分钟高压灭菌消毒或在有盖的容器中煮沸消毒；培养液十珍珠岩或砂或蛭石的消毒：培养液经120℃,20分钟高压消毒或在有盖的容器中煮沸20分钟；珍珠岩、砂、蛭石用一容器装好经120℃,30分钟的高压灭菌。

7．按照权利要求1的方法，其中所述的无糖培养工序包括：①在无菌条件下，将试管苗分段或分株转接到已装好培养基的培养箱内；②弱光照时期为7～10天，其照度为2500～2700勒克斯，每天光照时间10～12小时，培养温度为22～25℃；③强光照时期从第8～11天开始，其照度调整为6000～8000勒克斯，每天光照14～16小时；④第8天输入CO₂，输入CO₂的时间和光照同步进行，其浓度为2000～3500PPm；⑤湿度控制：0～3天或0～5天培养箱内的湿度为100％以后逐渐降为75～85％，20天后为70％；20～25天则可出苗，可直接移栽到苗床和营养袋中，18～25天便可成为商品苗。