[发明专利]单体胰岛素的制备方法无效
| 申请号： | 98110912.8 | 申请日： | 1998-06-23 |
| 公开（公告）号： | CN1061373C | 公开（公告）日： | 2001-01-31 |
| 发明（设计）人： | 张友尚;李默漪;崔大敷;周国明;冯佑民 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生物化学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/17 | 分类号： | C12N15/17;C07K14/62;C12P21/00;A61K38/28 |
| 代理公司： | 上海华东专利事务所 | 代理人： | 汪克臻 |
| 地址： | 200031 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 单体 胰岛素 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1、单体胰岛素的制备方法，将单体胰岛素前体(monomeric insulinprecursor,MIP)与三肽或四肽转肽反应而获得B链羧端去五肽(DPI)或去四肽胰岛素(DTI)，其特征在于：
所述DPI的三肽转肽条件是：以MIP和Gly-Phe-Phe为底物，溶于DMSO/1,4-丁二醇/水混合液，PH7.0-8.5，用胰蛋白酶催化；
所述DTI的四肽转肽条件是：MIP和Gly-Phe-Phe-Tyr(Obut)2为底物，溶于DMSO/1,4-丁二醇/水混合液，PH7.0-8.0，用胰蛋白酶催化。
2、根据权利要求1所述的单体胰岛素的制备方法，其特征在于所述MIP的特征在于连接B22和A1的肽段，除C端的碱性氨基酸以外无其它Lys或Arg氨基酸，MIP与三肽或四肽的反应部位为MIP B22位Arg的羧基。
3、根据权利要求2所述的单体胰岛素的制备方法，其特征在于所述MIP在酵母系统中表达，表达质粒为pZW[B29 Thr]PIP，用它转化酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae(XV-700-6B)而获得工程菌株YS98(CGMCCNo.0340)。
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