[发明专利]生产植酸酶的方法

权利要求书

1．用于生产具有植酸酶活性的多肽的方法，包括在含有一定量的磷酸或磷酸盐化合物的液体培养基中培养用重组载体转化的博伊丁氏假丝酵母转化体细胞，所述载体具有甲醇诱导型启动子，和定位于所述启动子的下游并且可操作连接到所述启动子上的编码具有植酸酶活性的多肽的基因，所述磷酸或磷酸盐化合物的量限制所述博伊丁氏假丝酵母转化体细胞的增殖，以便当向培养基中加入甲醇的同时，使所述博伊丁氏假丝酵母转化体细胞的量基本上没有增加，从而使所述细胞分泌所述多肽。

2．根据权利要求1所述的方法，其中所述启动子是博伊丁氏假丝酵母的乙醇氧化酶1基因的启动子。

3．根据权利要求1所述的方法，其中所述的液体培养基中含有所述磷酸或磷酸盐化合物的量以磷酸根计算为0.3-3.0克/升。

4．根据权利要求1所述的方法，其中连续培养不少于10天。

5．根据权利要求1-4任一项所述的方法，其中所述的具有植酸酶活性的多肽是西方喜旺氏酵母的植酸酶。

6．根据权利要求5所述的方法，其中所述的博伊丁氏假丝酵母转化体是MT-40544(FERM BP-5936)。

7．一种重组载体，它含有甲醇诱导型启动子，和定位于启动子的下游并且可操作连接到所述启动子上的编码具有植酸酶活性的多肽的基因，所述重组载体能够在宿主细胞中表达所述基因。

8．根据权利要求7所述的重组载体，其中所述启动子是博伊丁氏假丝酵母的醇氧化酶1基因的启动子。

9．根据权利要求7所述的重组载体，其中所述的具有植酸酶活性的多肽是西方喜旺氏酵母的植酸酶。

10．博伊丁氏假丝酵母转化体，它是用权利要求7-9任一项所述的重组载体转化的。

11．根据权利要求10所述的博伊丁氏假丝酵母转化体，它是MT-40544(FERM BP-5936)或其突变体。