[发明专利]微生物、微生物棉饼脱毒剂及其制造方法无效
申请号: | 98100824.0 | 申请日: | 1998-02-18 |
公开(公告)号: | CN1063225C | 公开(公告)日: | 2001-03-14 |
发明(设计)人: | 何策熙;肖文琳;何琳 | 申请(专利权)人: | 何策熙 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;A23K1/14;A23J1/14;A23J3/14;C12S3/00;//C12N1/14;C12R1645 |
代理公司: | 农业部专利事务所 | 代理人: | 黄家俊 |
地址: | 100094 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 微生物 脱毒 及其 制造 方法 | ||
1、一种微生物,其特征是嗜热性侧孢霉(sporotrichum thermophile)中的一种,名为‘文01’号,1998年二月九日保藏于CGMCC,保藏号为CGMCC№ 0339,另一种,糖化菌2000年6月19日保藏于CGMCC,保藏号为CGMCC NO.0459。
2、一种微生物棉饼脱毒剂其特征是以‘文01’号为基础,加上糖化菌和AS.1.807细菌组成的复合菌剂。
3、一种微生物棉饼脱毒剂的制造方法,包括菌种培养和脱毒剂的制造,其特征在于:
㈠‘文01’号菌种生产的工艺过程:
(1)一级菌种培养:一级菌种由最原始斜面一级菌种扩繁而来,一支斜面菌种可扩接30~40支一级菌种,培养基为PDA或麦芽汁,PH值为6.7~6.9,培养温度为38°-42℃,培养时间为72小时;
(2)二级菌种培养:将一级菌种接种于麦粒培养基上,麦粒培养基的制作方法是:先称取麦粒5Kg,在清水中浸泡12小时,再放入锅内煮沸,直至麦粒无白心为止,涝出晾干,在通风处晾至无明水,再加入碳酸钙15克,石膏60克,将麦粒拌匀即可,麦粒用玻璃瓶分装,PH值为6.7~6.9,一支一级菌种可接两瓶,培养温度为38~42℃,培养时间为3~4天;
(3)三级菌种培养:可用二级菌种进行扩繁,培养基仍为麦粒,一般一瓶二级种可以扩接30~40瓶,将三级菌种从瓶内掏出,晾干后粉碎即成三级菌种;
㈡糖化菌菌种生产的工艺过程:
糖化菌与‘文01’号菌种同源,前者系高温型菌种,主要分泌糖化酶,其作用是将多糖分解为单糖,培养温度为43~45℃,而‘文01’号系中温型菌种,它分泌纤维素酶,其作用是分解纤维素和半纤维素,培养温度为38~42℃,一、二、三级菌种的生产过程和‘文01’号相同;
㈢AS.1.807菌种生产的工艺过程:
AS.1.807菌种是一种细菌,它能产生蛋白酶,它的各级菌种生产配方如下:
(1)一级菌种培养基:牛肉膏5克,蛋白胨10克,Nacl 0.5克,葡萄糖10克,琼脂18~20克,清水1000ml,PH值为7,培养温度为28~32℃,培养时间3~4天;
(2)二级菌种培养基:(液体培养)
葡萄糖10克,牛肉膏3克,蛋白胨10克,Nacl0.5克,碳酸钙3-5克,清水1000ml,PH值为7;
制成液体培养基后,分装于250-300ml的三角瓶中,每瓶150ml,在105℃的压力下灭菌1.5小时,灭菌结束后,待冷至25℃,用无菌水稀释一级菌种,一般一支一级菌种接两瓶,每天摇瓶3-4次,培养温度为28~32℃,培养72小时,当液面出现少许白色菌丝即可;
(3)三级菌种培养:采用固体培养基,曲盘大量培养;
米糠20%,麦夫60%,豆饼10%,玉米面5%,骨粉5%(重量百分比),另加清水25-30%;
按以上比例将料备足,用水将料拌匀,在105℃下灭菌2小时,趁热分装于曲盘中,在恒温室培养,当料温降至25℃时,按干料重的10%接入液体菌种,在28-32℃培养,每天翻料3-4次,培养料用消过毒的布或纤维袋复盖,培养5天,当料面长出白色菌丝,料温降至室温即可,将培养料取出烘干或阴干备用;
㈣微生物脱毒剂的制造:
按玉米面30%,麦夫30%,棉饼35%,红糖5%(重量百分比),再加原菌5%,原菌由三种菌合成,即‘文01’号50-70%,糖化菌15-20%,AS.1.807 15-20%,另加水50%;
先将红糖溶于少量水中,再加入棉饼、玉米面和麦夫,然后将水加足,然后在盆、缸或水泥地上分三层发酵,在一、二层上各撒原种2%,盖上第三层后撒原种1%,堆成馒头状,顶部用手抹平,打上若干通风孔,盖上麻袋或布保湿,经3-4天发酵,白色菌丝布满料面,有甜香味即成。
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