[发明专利]来自绿色木霉的纤维素酶cbh1基因的调控序列以及利用该序列的蛋白质或多肽的大量生产体系

权利要求书

1．来自Trichoderma viride的纤维素酶cbh1基因调控序列。

2．质粒pA01中的cbh1基因的启动子序列。

3．权利要求2记载的启动子序列，包含从cbh1基因的氨基末端到上游大约1.5kb区域内的序列或保持高启动子活性的其变化序列。

4．权利要求3记载的启动子序列，其中cbh1基因的氨基末端到上游大约1.5kb区域内的序列是从质粒pA01中的cbh1基因的氨基末端到上游的HindⅢ位点的序列。

5．质粒pA01中的cbh1基因的信号序列。

6．权利要求5记载的信号序列，是序列1记载的编码-17到-1氨基酸序列的碱基序列或其碱基序列的变化序列、编码依然保持信号序列活性的氨基酸序列的碱基序列。

7．质粒pA01中的cbh1基因的终止子序列。

8．权利要求7记载的的终止子序列包含存在于从cbh1基因的羧基端到下游1kb的区域内的序列或保持活性的其变化序列。

9．权利要求8记载的的终止子序列，其中从cbh1基因的羧基端到下游1kb的区域内存在的序列是从质粒pA01中的cbh1基因的羧基端到下游的SalⅠ位点的序列。

10．含有权利要求1记载的来自Trichoderma viride的纤维素酶cbh1基因调控序列的表达载体。

11．权利要求10记载的表达载体，含有可操作的连接于其调控序列的编码目的蛋白质或肽的碱基序列。

12．至少含有从权利要求2～9中任一项记载的由启动子、信号序列、以及终止子中选择出的一种序列的表达载体。

13．权利要求12记载的表达载体，含有权利要求2～4中任一项记载的启动子序列。

14．权利要求12或13中任一项记载的表达载体，含有可操作的连接于上述序列的编码目的蛋白质或肽的碱基序列。

15．权利要求11～14中任一项记载的表达载体，其中，上述目的蛋白质是来自Humicola insolens的葡聚糖内切酶或其变化蛋白质。

16．权利要求15记载的表达载体，其中，来自Humicola insolens的葡聚糖内切酶是葡聚糖内切酶NCE4。

17．权利要求11～14中任一项记载的表达载体，其中，上述目的蛋白质是来自Trichoderma viride的葡聚糖内切酶或其变化蛋白质。

18．权利要求17记载的表达载体，其中，来自Trichoderma viride的葡聚糖内切酶是葡聚糖内切酶SCE3。

19．权利要求11～14中任一项记载的表达载体，其中，上述目的蛋白质是来自Trichoderma viride的木聚糖酶或其变化蛋白质。

20．权利要求19记载的表达载体，其中，来自Trichoderma viride的木聚糖酶是木聚糖酶SXY1。

21．权利要求10～20中任一项记载的表达载体，还含有选择标记。

22．权利要求21记载的表达载体，其中，选择标记是潮霉素B抗性基因。

23．表达载体pCB1-MX、pCB1-M2XR、pCB1-HEgX、pCB1-Eg3X、pCB-XI′。

24．由权利要求10～23中任一项记载的表达载体转化的宿主细胞。

25．权利要求24记载的宿主细胞，是属于Trichoderma属的微生物。

26．权利要求25记载的宿主细胞，其中属于Trichoderma属的微生物是Trichoderma viride。

27．权利要求26记载的宿主细胞，其中属于Trichoderma属的微生物是作为Trichoderma viride的纤维素酶高产菌株的Trichoderma virideMC300-1菌株或其系统。