[发明专利]曲霉属胆色素原合酶和编码该酶的核酸

权利要求书

1．一种基本上纯化的胆色素原合酶，该酶

(a)得自一种曲霉菌株；

(b)具有一个氨基酸序列，该氨基酸序列与SEQ ID NO:2所描述的氨基酸序列有至少50％同源性；或者

(c)为一个核酸序列所编码，该核酸序列能够在高度严格条件下与一种探针进行杂交，该探针在所说的条件下与SEQ ID NO:1所描述的核酸序列杂交。

2．按照权利要求1的胆色素原合酶，该胆色素原合酶得自一种米曲霉菌株。

3．按照权利要求2的胆色素原合酶，该胆色素原合酶得自米曲霉IFO4177或其突变体菌株。

4．按照权利要求1的胆色素原合酶，该胆色素原合酶具有与SEQ IDNO:2所描述的氨基酸序列有至少50％、优选为至少60％、更优选为至少70％、更优选为至少80％、以及最优选为至少90％的同源性的一个氨基酸序列。

5．按照权利要求4的胆色素原合酶，该酶具有SEQ ID NO:2所描述的氨基酸序列。

6．按照权利要求1的胆色素原合酶，该酶为一个核酸序列所编码，该核酸序列能够在高度严格条件下与一种探针进行杂交，该探针在所说的条件下与SEQ ID NO:1所描述的核酸序列杂交。

7．一种分离的核酸片段，该核酸片段包含编码权利要求1的胆色素原合酶的核酸序列。

8．按照权利要求7的核酸片段，其中的核酸序列编码得自米曲霉的胆色素原合酶。

9．按照权利要求8的核酸片段，其中的核酸序列编码得自米曲霉IFO4177的胆色素原合酶。

10．按照权利要求9的核酸片段，其中的核酸序列描述在SEQ IDNO:1中。

11．按照权利要求7的核酸片段，该核酸片段包含编码胆色素原合酶的核酸序列，该胆色素原合酶具有与SEQ ID NO:2所描述的氨基酸序列有至少50％、优选为至少60％、更优选为至少70％、更优选为至少80％、以及最优选为至少90％的同源性的一个氨基酸序列。

12．按照权利要求7的核酸片段，该核酸片段能够在高度严格条件下与一种探针进行杂交，该探针在所说的条件下与SEQ ID NO:1所描述的核酸序列杂交。

13．一种包含权利要求7的核酸片段的核酸构建体，该核酸片段可操作地连接到能够指导上述胆色素原合酶在合适的表达宿主中表达的调节区上。

14．一种包含权利要求13的核酸构建体的重组载体。

15．按照权利要求14的载体，其中的核酸序列可操作地连接到一个启动子序列上。

16．按照权利要求15的载体，该载体还包含一个转录终止信号。

17．按照权利要求15的载体，该载体还包含一个选择性标记。

18．一种包含权利要求13的核酸构建体的重组宿主细胞。

19．按照权利要求18的宿主细胞，其中的核酸构建体包含在一个载体上。

20．按照权利要求18的宿主细胞，其中的宿主细胞是细菌细胞。

21．按照权利要求18的宿主细胞，其中的宿主细胞是真菌细胞。

22．按照权利要求21的宿主细胞，其中的真菌细胞是丝状真菌细胞。

23．按照权利要求22的宿主细胞，其中的丝状真菌细胞是顶孢霉属、曲霉属、镰刀菌属、腐质霉属、毁丝霉属、毛霉属、脉孢菌属、青霉菌属、梭孢壳属、Tolypocladium或者木霉属物种的细胞。

24．按照权利要求21的宿主细胞，其中的真菌细胞是酵母细胞。

25．按照权利要求24的宿主细胞，其中的酵母细胞是酵母属或者裂殖酵母属的菌株。

26．按照权利要求18的宿主细胞，其中的核酸构建体被整合到宿主细胞基因组中。

27．一种产生权利要求1的胆色素原合酶的方法，该方法包括：(a)培养曲霉属菌株以产生胆色素原合酶；以及(b)回收胆色素原合酶。

28．一种产生权利要求1的胆色素原合酶的方法，该方法包括：(a)培养包含核酸构建体的宿主细胞，该核酸构建体包含在有助于胆色素原合酶表达的条件下编码胆色素原合酶的核酸序列；以及(b)回收胆色素原合酶。