[发明专利]干扰素结合物

说明书

干扰素，尤其是干扰素2α为一有药物活性的蛋白质，其具有抗病毒及抗增殖的活性。例如，干扰素可用来治疗毛状细胞白血病及卡波济肉瘤，并且其还具有抗肝类的活性。具有药物活性的蛋白质如干扰素，为了改善稳定性及可溶性，并减低免疫原性，药物活性蛋白如干扰素可与聚合物聚乙二醇(PEG)结合。

蛋白质治疗的生物利用度常因其较短的血浆半衰期而受到限制，这样也就阻止了这类药物的最大临床效力。近年来，PEG结合的生物分子已经显现出临床上有用途的性质(Inada et al.，J.Bioact.and CompatiblePolymers 5，343(1990)；delgado et al.，Critical Reviews in TherapeuticDrug Carrier System 9，249(1992)；Katre，Advanced Drug Deliverysystems 10，91(1993))。其优点是有较好的物理及热稳定性，防止酶的降解，增加可溶性，在体内更长的循环半衰期，清除率降低及效力增强。据报道支链PEG结合物较线性PEG结合物具有更高的pH值及更好的热稳定性，并且更不容易被蛋白分解(Monfardini et al.，Bioconjugate Chem.6，62(1995))。PEG蛋白质的其它特性为不仅降低毒性，而且减低了免疫原性及抗原性。某些蛋白质PEG化的另一个作用是伴随着体内活性的增强而体外活性下降。已经观察到的有这种作用的蛋白质有G-CSF(Satake-Ishikawa et al.，Cell Structure and Function 17，157-160(1992))，IL-2(Katre et al.，Proc.Natl.Acad.Sci，USA 84，1487(1987))，TNFα(Tsutsumiet al.，Jpn.J.Cancer Res.85，9(1984))，IL-6(Inoue et al.，J.Lab.Clin.Med.124，529(1994))及CD4-IgG(Chamow et al.，Bioconj.Chem.5，133(1994))等。

有关干扰素，现已观察到PEG化后在体外实验中降低了其抗病毒的活性，但却增加了对人肿瘤细胞抗增殖的活性。本发明新的PEG干扰素结合物有一个显著的特点在于，其抗增殖的活性不仅远远高于干扰素也远远高于其它的PEG干扰素结合物。虽然该结合物抗增殖的活性大大高于其它PEG干扰素α结合物，然而它们的抗病毒活性下降却是类似的。此外，本发明的PEG干扰素α结合物无免疫原性，所以实际上不引起抗体的产生。相反地其它的PEG干扰素α结合物却可引起有限的抗体产生。

因此，本发明所述的为一种新类型的干扰素α(IFNα)PEG衍生物。本发明结合物为下面我们还会看到的支链PEG结构。支链PEG优点是在一个结合位点可以结合2个线性PEG分子，这样就可以在不增加PEG化位点的情况下加倍地结合PE G数量、

与未经修饰的IFNα(即未结合PEG的IFNα)比较，伴随着体外抗病毒活性下降，结合物增加了循环半衰期及血中住留时间，降低了免疫原性，清除率下降，并且增加了抗增殖活性。与其它的PEG-IFNα结合物比较，本发明的结合物有更强的抗增殖活性，其它的特性也有不成比例的增高或减低，并且实际上没有免疫原性。

本发明生理活性PEG-IFNα结合物具有下式：

与IFNα一样，本发明结合物具有同样的用途，例如抗增殖用途。另外，本发明的PEG干扰素α结合物还可用来治疗免疫调节异常性疾病，例如肿瘤。同理IFNα类药物(尤其IFNα2a)也用来治疗如毛状细胞白血病，CML，卡波济肉瘤及感染疾病等。但本发明结合物改善了一些特性，这包括优良的稳定性，更大的溶解性，循环半衰期及血浆住留时间延长。此外，还有这些结合物的抗增殖活性要比IFNα增强。另外，正如上面已经提到的该结合物显示出出人意料的抗病毒活性及抗增殖活性差别。这一特点对于增加结合物所需的活性，而减少或消除其所不需要的活性是很有用的。例如，如果所不需要的副作用是与其抗病毒的活性联系在一起的，那么消除抗病毒活性应能够消除该副作用而保留其抗增殖活性。因此，本发明还包括基于式I化合物或者其盐的药物组合物，以及制备它们的方法。

用来控制或预防疾病的本发明药物组合物包括通式I的干扰素结合物和无治疗作用，无毒的及治疗上可接受的载体物质。所使用的药物组合物可根据要治疗的疾病，病人个体的情况，蛋白质结合物的给药位点，给药方式及其它一些因素来制备并制成一定剂量的剂型。