[发明专利]鹿茸细胞的工业化生产方法无效
| 申请号: | 97111856.6 | 申请日: | 1997-06-26 |
| 公开(公告)号: | CN1064080C | 公开(公告)日: | 2001-04-04 |
| 发明(设计)人: | 梁国坚;康中影;张桂珍 | 申请(专利权)人: | 梁国坚 |
| 主分类号: | C12N5/06 | 分类号: | C12N5/06 |
| 代理公司: | 北京万科园专利事务所 | 代理人: | 张亚军,李丕达 |
| 地址: | 510180 广州市中*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 鹿茸 细胞 工业化 生产 方法 | ||
1.一种鹿茸细胞株,其保藏号为CGMCC NO.0308。
2.一种鹿茸细胞株的制备方法,其特征在于:
(1)从幼嫩鹿茸生长点采取生茸细胞,排列于细胞培养瓶做贴壁培养,加细胞生长液(一),34℃培养待长出单层,弃去原始组织,用0.25%胰酶液消化分散细胞做连续传代培养,根据细胞数量逐步分瓶扩大,并向较大培养瓶过度,温度由34℃升高到37℃,连续传代培养至20代,当出现生长缓慢时,使用生长液(二),传代至30代;
(2)将上述细胞株接种于装有生长液(一)的培养瓶中,温度为34-37℃,培养转数为6-30转/小时,培养时间为3-7天,连续传代30-150代,得到权利要求1的鹿茸细胞株,CGMCC NO.0308;
其中细胞生长液(一)的配方为:
E-MEM 78%
新生犊牛血清 20%
卡那霉素 1%
碳酸氢钠液 1%
细胞生长液(二)的配方为:
E-MEM 90%
新生犊牛血清 7%
细胞生长促进物 2%
卡那霉素 1%
碳酸氢钠 调PH7.0-7.2
所述的细胞生长促进物为鹿血浆鹿肝浸出液:Eagle液为1∶10。
3.权利要求1鹿茸细胞株用于工业化生产鹿茸细胞的用途,其特征在于将权利要求1所述的鹿茸细胞株接种至权利要求2中描述的细胞生长液(一)中,34-37℃恒温下,5-8分钟旋转一周,培养24-72小时,获得鹿茸细胞。
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