[发明专利]用于生产γ－环糊精的环糊精糖基转移酶

权利要求书

1、一种环糊精糖基转移酶蛋白，其在将淀粉底物转化为环糊精时产生的γ-环糊精量比野生型高，同时，与用于制备其的原型环糊精糖基转移酶相比较，其环糊精糖基转移酶总比活仍显示出至少60％的活性，该环糊精糖基转移酶蛋白包括环糊精糖基转移酶，所述环糊精糖基转移酶的氨基酸序列与原型环糊精糖基转移酶的氨基酸序列的区别在于第155位至包括第195位氨基酸在内的区域中，有4-8个氨基酸缺失，这种缺失导致所述蛋白的γ-环糊精糖基转移酶活性的提高，此处，蛋白质序列的第1位为环糊精糖基转移酶的信号肽的起始位点。

2、如权利要求1所述的环糊精糖基转移酶蛋白，其中其蛋白质序列的第155到第195位氨基酸区域中有6个氨基酸残基被缺失，这样的缺失导致蛋白的γ-环糊精糖基转移酶活性的提高，此处，蛋白质序列的第1位为环糊精糖基转移酶的信号肽的起始位点。

3、如权利要求1所述的环糊精糖基转移酶蛋白，其氨基酸序列不同于SEQID NO：1-4中所列环糊精糖基转移酶的氨基酸序列之处在于至少分别缺失了如下氨基酸残基：相对于SEQ ID NO：1缺失了LETDPS，相对于SEQ ID NO：2缺失了DRDNPG，相对于SEQ ID NO：3缺失了LETNPN，相对于SEQ ID NO：4缺失了METDTS，而其余的氨基酸序列与SEQ ID NO：1-4所列的各种微生物来源的环糊精糖基转移酶氨基酸序列同源，所述序列所显示的环糊精糖基转移酶活性与未缺失的原型环糊精糖基转移酶相同。

4、一种制备编码环糊精糖基转移酶的突变基因的方法，其中通过周知的诱变方法，使编码原型环糊精糖基转移酶的DNA序列发生突变，从而使得由突变基因的DNA序列所编码的第155到第195位区域的氨基酸序列与由未诱变的基因的DNA编码的氨基酸序列相比，缺失了4-8个氨基酸残基。

5、如权利要求4所述的方法，其中通过周知的诱变方法，使编码原型环糊精糖基转移酶的DNA序列发生突变，从而使得由突变基因的DNA序列所编码的第155到第195位区域的氨基酸序列与由未诱变的基因的DNA编码的氨基酸序列相比，缺失了6个氨基酸残基。

6、一种编码如权利要求1所述的环糊精糖基转移酶蛋白的DNA序列。

7、一种制备γ-环糊精糖基转移酶的方法，其中将至少一种如权利要求6所述的DNA序列在微生物中表达。

8、一种利用环糊精糖基转移酶通过转化淀粉来制备γ-环糊精的方法，其中采用至少一种如权利要求1至3任一项中所述的环糊精糖基转移酶蛋白作为环糊精糖基转移酶。