[发明专利]化学修饰的干扰素

说明书

本发明一般地涉及对共有干扰素(consensus interferon)的修饰，更具体地说，涉及重组共有干扰素的新糖基化(neoglycosylated)类似物组合物，其中糖基配体结合于重组共有干扰素。

发明背景

干扰素是细胞因子的一个亚类，既具有抗病毒活性，又具有抗增殖活性。根据其生物化学和免疫学特征，人干扰素可分为三类：α-干扰素(白细胞干扰素)，β-干扰素(成纤维细胞干扰素)，及γ-干扰素(免疫干扰素)。通过对编码这些多肽的DNA进行分离和测序，已经确定了至少14种具有不同氨基酸序列的α-干扰素(又可分为亚型A-H)。α-干扰素由于其抗病毒和抗肿瘤生长的抑制作用，作为一种潜在的治疗药剂受到了相当大的关注。

目前在美国和其它一些国家已准许将α-干扰素用于治序多毛细胞白血病、性器官疣、卡氏肉瘤(一种通常折磨获得性免疫缺损综合症(艾滋病)病人的癌)及慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染。α-干扰素的如下二种变异体已获准用于治疗：以商品名Roferon-A销售的α-干扰素-2a，以及以商品名INTRONA销售的α-干扰素-2b。

除所标明的适应症外，α-干扰素正用于通过单独给药或者与化学治疗药剂联合用药，治疗其它多种细胞增殖性疾病，或对其进行疗效评定，这些疾病包括：慢性骨髓性白血病、多发性骨髓瘤、浅表膀胱癌、皮肤癌(基底细胞癌和恶性黑素瘤)、肾细胞癌、卵巢癌、低级淋巴细胞和表层T细胞淋巴瘤、以及神经胶质瘤。通过与其它化学治疗药剂联合给药，α-干扰素可有效地治疗由肺癌、结肠癌和乳房癌产生的实体肿瘤(见Rosenberg等，“生物治疗原理和应用”，《癌：肿瘤学原理和实践》第3版，Devita等编，pp.301-547(1989)，Balmer DICP，AnnPharmacother24，761-768(1990))。

已知α-干扰素能影响多种细胞功能，包括在正常细胞和异常细胞中的DNA复制及RNA和蛋白质合成。因此，干扰素的细胞毒性作用不局限于肿瘤细胞或病毒感染的细胞，它也对正常、健康的细胞也有同样的影响。结果，在干扰素治疗过程中，特别是需要用大剂量时，会产生不良的副作用。以干扰素给药能导致骨髓抑制作用，引起红血细胞、白血细胞和血小板数量减少。更高剂量的干扰素给药通常会引起流感样症状(例如发热、疲劳、头痛和寒战)，胃肠道紊乱(例如厌食、恶心和腹泻)、眩晕以及咳嗽。

天然人类β-干扰素是一种糖蛋白，表观分子量约22-23KDa，抗病毒比活性为2-5×10⁸国标单位(IU)/毫克蛋白质。人β-干扰素(IFN-β)已用于临床治疗神经胶质瘤、黑素瘤、病毒性皮肤病和肝炎，见《干扰素，原理及医学应用》，第一版(1992，Univ of TexasMedical Branch of Galveston)P107-116。

美国专利4,695,623和4,897,471号公开了新的干扰素多肽，其氨基酸序列含有在天然存在的α-干扰素亚型多肽中各个位置发现的，常见的或者占优势的氨基酸，该多肽被称为共有干扰素(IFN-con)。所公开的特异性IFN-con氨基酸序列，被定名为IFN-con₁，IFN-con₂和IFN-con₃。编码IFN-con的人工合成基因的制备和该基因在大肠杆菌中的表达也已公开。

Klein等(J.Chromatog.454，205-215(1988))描述了对大肠杆菌产生的IFN-con₁的纯化方法。据报导，按这种方法纯化的IFN-con₁，当用人T98G细胞系进行细胞病变效应抑制作用测定时，比活性为3×10⁹单位/毫克蛋白质(Fish等，J.Interferon Res.9，97-144(1989))。

美国专利5,372,808号公开了用共有干扰素治疗疾病的方法。表明当IFN-con用于治疗对α-干扰素治疗敏感的疾病时，对病人不会引起与用α-干扰素同样程度的副作用。并进一步表明，可用3-5倍更高剂量的IFN-con，得到了更好的治疗效果，而不良副作用出现的频率或严重程度基本上没有相应增加。