[发明专利]一种对白细胞介素-5受体依赖细胞信息传递通路有调整作用的物质筛选方法

权利要求书

1、测定一种物质对人或动物细胞的依赖于受体的信息传递通路的调节作用的方法，其特征在于，物质对信息传递通路某一成份的调节作用，该通路是通过活化白细胞介素-5(IL-5)受体来启动，该物质的调节作用是通过培养哺乳动物细胞而测定的，该细胞

a)用含一个指示基因和一个调节顺序的重组DNA转化，这些细胞对耦连到白细胞介素-5受体的信息传递通路的一个或多个第二信使物质的浓度变化起反应用，以致通过第二信使物质的浓度变化调整指示基因的表达；

b)表达功能性白细胞介素-5受体

细胞和待测物一起孵育，测定指示基因产物的浓度并研究确定检测物的作用是否对依赖于白细胞介素-5受体的信息传递通路有选择性。

2、按权利要求1的方法，其特征在于，研究检测物对依赖于白细胞介素-5受体的信息传递通路的拮抗作用，其中把细胞介素-5捕获到细胞上。

3、按权利要求1的方法，其特征在于，利用自然表达功能性白细胞介素-5受体的细胞。

4、按权利要求1的方法，其特征在于，利用仅自然表达白细胞介素-5受体的β-亚基和用重组DNA转化的细胞，该重组DNA含有为白细胞介素-5受体的α-亚基编码的顺序，因此，该转化细胞可表达功能性白细胞介素-5受体。

5、按权利要求1的方法，其特征在于，利用重组DNA转化的细胞，该重组DNA含有对白细胞介素-5受体的α-和β-亚基编码的顺序，因此，该转化细胞表达功能性白细胞介素-5受体。

6、按权利要求5的方法，其特征在于，对α-亚基和对β-亚基编码的DNA顺序位于分开的两个质粒上。

7、按权利要求1-6之一的方法，其特征在于，细胞表达功能性人白细胞介素-5受体。

8、按权利要求1-6之一的方法，其特征在于，细胞表达一个功能性大鼠白细胞介素-5受体。

9、按权利要求1-6之一的方法，其特征在于，细胞表达一个功能性白细胞介素-5受体，该受体的α-亚基和β-亚基来源于不同物种。

10、按权利要求9的方法，其特征在于，α-亚基来源于人。

11、按权利要求1-10之一的方法，其特征在于，在a)定义的重组DNA作为调节顺序含有c-fos基因的启动子。

12、按权利要求1-10之一的方法，其特征在于，在a)定义的重组DNA作为调节顺序含有ICAM-I基因的启动子。

13、按权利要求11或12的方法，其特征在于，在a)定义的重组DNA作为指示基因含有一个萤光素酶基因。

14、按权利要求2-13之一的方法，其特征在于，研究检测物的拮抗作用，其中，也通过培养细胞，该细胞表达功能性白细胞介素-5受体及其它生长因子的受体，它至少依赖于这些受体之一的配体的存在，一方面，单独用白细胞介素-5孵育这些细胞，另一方面，用白细胞介素-5和检测物一起孵育这些细胞，并比较两种细胞培养物的增殖情况。

15、按权利要求1-13之一的方法，其特征在于，检测物质对依赖于白细胞介素-5受体的信息传递通路的调节作用的选择性，是通过在相同条件下，把这些物质捕获到哺乳动物对照细胞上，这些细胞表达一个不同于白细胞介素-5受体的对照受体和这些细胞可用a)定义的重组DNA转化，这些重组DNA的调节顺序也对耦联到对照受体的信息传递通路的第二信使物质的浓度变化起反应；并把表达白细胞介素-5受体的细胞内指示基因产物的浓度和对照细胞内的浓度进行比较。

16、按权利要求15的方法，其特征在于，对照受体是白细胞介素-3受体。

17、按权利要求1-13之一的方法，其特征在于，在相同条件下，用研究的物质孵育哺乳动物细胞和测定指示基因产物的浓度，该细胞用a)定义的重组DNA转化的、不表达功能性白细胞介素-5受体。

18、按权利要求1-17之一所述的方法，其特征在于，这作为筛选分析而加以利用，其中，要研究的物质是很多种物质中的一种，用预定哺乳动物细胞数和在预定条件下把细胞与这些物质一起孵育，测定指示基因产物的浓度，并检查物质对依赖于白细胞介素-5的信息传递通路的选择性。