[发明专利]富含异黄酮化合物的分离蛋白及其生产方法

说明书

本发明涉及富含异黄酮的植物分离蛋白及其制备方法。

异黄酮存在于各种豆科植物中，包括植物蛋白原料如大豆。对于本发明来说，这些化合物一般包括黄豆苷、60AC-黄豆苷、黄豆苷原、染料木苷、60AC染料木苷、染料木黄酮、大豆异黄酮、生原禅宁-A、芒柄花黄素和拟雌内酯。通常这些化合物与大豆固有的苦味有关，在生产商品如分离物和浓缩物时，焦点一直集中在如何除去这些物质。例如，在传统的生产大豆分离蛋白的方法中，用碱液介质浸取大豆片，大部分异黄酮溶解在浸出液中并在乳清中保持溶解状态，用酸沉淀蛋白质形成分离物后乳清通常被排掉。通过彻底洗涤分离物通常可以除去残留在酸沉淀的分离蛋白中的异黄酮。

最近人们认识到植物蛋白如大豆中所含的异黄酮能抑制人类癌细胞的生长，如在下列文献中描述的乳腺癌细胞和前列腺细胞：Peterson和Barnes的“Genistein Inhibition of the Growth of Human Breast Cancer Cells：Independence from Estrogen Receptors and the Multi-Drug Resistance Gene”（Biochemical and Biophysical Research Communications，Vol.179，NO. 1，P. 661-667，August 30，1991），Peterson和Barnes的“Genistein and Biochanin A Inhibit the Growth of Human Prostrate Cancer Cells but not Epidermal Growth Factor Receptor Tyrosine Autophosphorylation”，（The Prostate 22:335-345（1993））以及Barnes等人的“Soybeans Inhibit Mammory Tumors in Models of Breast Cancer”（Mutagens and Carcinogens in the Diet P.239-253（1990）.）。

上述令人感兴趣的异黄酮引起对适合于在膳食中摄取的富含这些化合物的蛋白质物料的需求，而在以前生产商品蛋白质材料的方法中总是尽可能地除去这些化合物。

因此，本发明的目的是提供一种富含异黄酮的分离蛋白及其生产方法。此目的和其它目的在下面详细描述的本发明中能够实现。

本发明涉及一种富含异黄酮的植物分离蛋白及其生产方法，本发明的方法包括用PH值高于大约蛋白质等电点的含水提取剂提取植物蛋白质原料得到含有蛋白质和异黄酮的水相提取液。然后调节水相提取液的PH值至大约蛋白质材料的等电点以沉淀蛋白质材料。分离沉淀出的蛋白质材料，但避免或最大限度地减少对沉淀物的进一步的洗涤以防止失去剩余的异黄酮，提供富含异黄酮的分离物。另外，既然异黄酮容易溶解在用于溶解蛋白质的含水提取剂中，那么所采用的蛋白质原料与水的特定重量比应在提取过程中最大程度地溶解异黄酮。

对本发明来说，有用的异黄酮具有下列通式：

其中R₁、R₂、R₃和R₄可选自H、OH和OCH₃以及这些化合物的葡糖苷。具体地说，已从植物蛋白质原料分离出的这些化合物和其葡糖苷包括黄豆苷、60AC-黄豆苷、黄豆苷原、染料木苷、60AC-染料木苷、染料木黄酮、大豆异黄酮、生原禅宁-A、芒柄花黄素和拟雌内酯。本发明分离物富含的异黄酮优选包括黄豆苷、60AC-黄豆苷、黄豆苷原、染料木苷、60AC-染料木苷和染料木黄酮。

尽管本发明是针对大豆制品进行描述的，而且其方法特别适合于由大豆原料生产的富含异黄酮的分离物，但本发明方法一般也适用于从包含异黄酮的各种植物蛋白源中生产分离蛋白。

本发明的起始原料是大豆片，其中所含油已通过溶剂浸取从其中除去。用PH值大于大约蛋白质材料等电点的含水提取剂提取大豆片，优选的PH值大约为6.0-10.0，最优选的PH值大约为6.7-9.7。如果需要，可采用典型的碱性试剂来提高含水提取剂的PH值，提取剂包括氢氧化钠，氢氧化钾和氢氧化钙。所需的异黄酮化合物通常溶解在含水提取剂中，为了最大程度地回收含水提取液中的这些化合物，将薄片与含水提取液的重量比控制至特定的值上以便尽可能多的溶解蛋白质材料中固有的异黄酮。