[发明专利]有机化合物的或涉及有机化合物的改进无效
| 申请号: | 94100613.1 | 申请日: | 1994-01-14 |
| 公开(公告)号: | CN1053468C | 公开(公告)日: | 2000-06-14 |
| 发明(设计)人: | 赫里特·扬范霍尔斯特;马克·克罗伊格;维尔特·范德梅尔;埃里克·波斯特马;罗布·阿比斯蒂 | 申请(专利权)人: | S及G种子有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;C12N5/02;A01H4/00 |
| 代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 张元忠 |
| 地址: | 荷兰恩*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 有机化合物 涉及 改进 | ||
1.在悬浮培养物中获得具有基本上相同的倍性水平的体细胞胚的方法,该方法包括:
(i)将非胡萝卜属植物外植体材料培养于一种液体培养基中,该培养基含有约0.1mg/L-30mg/L促使诱导出原胚形成群(PEM)形成的生长素或生长素混合物;
(ii)在一种含有生长素的合适的液体培养基中扩增在(i)中获得的PEMs的数目;
(iii)收集(ii)中获得的PEMs并将它们置于基本上不含生长素的液体培养基中;以及
(iv)收集由(iii)中的PEMs产生的体细胞胚。
2.根据权利要求1的方法,该方法包括在步骤(iii)中使用经过尺寸选择且富含存活的PEMs的PEMs。
3.根据权利要求2的方法,其中的液体培养基进一步含有一种浓度在约15g/L和90g/L之间的碳水化合物能源。
4.根据权利要求3的方法,其中碳水化合物能源的浓度在约20g/L和60g/L之间。
5.根据权利要求4的方法,其中碳水化合物能源选自蔗糖、葡萄糖和棉子糖。
6.根据权利要求1的方法,其中在振动混合器中振动含有生长素的PEM悬浮物。
7.根据权利要求1的方法,其中振动混合器在基本上垂直的平面上振动。
8.根据权利要求1的方法,其中的外植体材料是由原生质体、茎、叶、花瓣、下胚轴区、顶端分生组织、合子胚本身、块茎、维管束、中柱鞘、子房或花药丝衍生而得。
9.从非胡萝卜属植物材料获得的体细胞胚悬浮培养物,包括具有基本上相同倍性水平的体细胞胚。
10.根据权利要求9所述的体细胞胚悬浮培养物,含有基本上为二倍体的体细胞胚。
11.根据权利要求9所述的体细胚悬浮培养物,含有基本上为四倍体的体细胞胚。
12.根据权利要求9所述的悬浮培养物,其中体细胞胚由从双子叶或单子叶外植体材料产生的PEMs衍生而得。
13.根据权利要求12所述的悬浮培养物,其中体细胞胚选自仙客来属、南瓜属、蕃茄属、葱属、秋海棠属、甜菜属、报春花属、芸苔属、辣椒属、菊苣属、扶郎花属、凤仙花属、莴苣属、稻属、天竺葵属、碧冬茄属、堇菜属以及玉蜀黍属。
14.根据权利要求13所述的悬浮培养物,它来自于双子叶外植体材料。
15.根据权利要求14所述的悬浮培养物,它选自仙客来属、南瓜属、甜菜属、芸苔属、堇菜属、天竺葵属以及辣椒属。
16.具有基本上相同倍性水平的非胡萝卜属体细胞胚。
17.根据权利要求16所述的体细胞胚,包含基本上都为二倍体的体细胞胚或基本上都为四倍体的体细胞胚。
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