[发明专利]由酶促反应制备的二聚IL-2以及用于制备该IL-2的源于神经的转谷氨酰胺酶

权利要求书

1、一种可从受损伤的鱼视神经获得的源于神经的转谷氨酰胺酶，它能将IL-2转变为具有少突神经胶质细胞胞毒活性的二聚IL-2。

2、根据权利要求1所说的源于神经的转谷氨酰胺酶，由SDS-PAGE和银染色法测得该酶的分子量为约55KDa。

3、根据权利要求1或2所述的源于神经的转谷氨酰胺酶，与完整的鱼视神经相比，在受损伤后的鱼视神经中检测到该酶有更大的含量。

4、根据权利要求1-3的任何一项所述的源于神经的转谷氨酰胺酶，该酶能将IL-2转变为有少突神经胶质细胞胞毒活性的二聚IL-2。

5、根据权利要求4所述的源于神经的转谷氨酰胺酶，该酶能将哺乳动物的IL-2转变为具有少突神经胶质细胞胞毒活性的二聚IL-2。

6、根据权利要求5所述的源于神经的转谷氨酰胺酶，该酶能将鼠重组IL-2转变为有少突神经胶质细胞胞毒活性的二聚IL-2。

7、一种根据权利要求5的来源于神经的转谷氨酰胺酶，它能将人重组IL-2转变为具有少突神经胶质细胞胞毒活性的二聚IL-2。

8、一种具有下列特征的源于神经的转谷氨酰胺酶TG_N：

（ⅰ）该酶是水溶性的;

（ⅱ）该酶是可从再生的鱼视神经获得;

（ⅲ）该酶能将免疫IL-2转变为有少突神经胶质细胞胞毒活性的二聚IL-2;

（ⅳ）该酶具有由SDS-PAGE和银染色法测定的分子量约55KDa;

（ⅴ）与完整的鱼视神经相比在受损伤的鱼视神经中测得该酶有更大的含量;

（ⅵ）该酶可将腐胺结合到载体蛋白中，表现出转谷氨酰胺酶族的检定特征。

（ⅶ）在pH＝9以及56℃结合腐胺时该酶有最大活性。

（ⅷ）在结合腐胺时，以其与底物的函数计算得到其Km值为5.5×10^-7;

（ⅸ）该酶在IL-2二聚化过程中是Ca²⁺依赖性酶;和

（ⅹ）在用抗相应于转谷氨酰胺酶的二个位点的肽的抗体进行的Western吸印分析试验中该酶显示出一条免疫反应谱带，所说肽选自于相应于转谷氨酰胺酶的活性位点的14-聚肽序列：Lys-Lys-Val-Lys-Tyr-Gly-Gln-Cys-Trp-Val-Phe-Ala-Gly-Val,以及一种10聚体肽序列:

Asn-Ser-Lys-Leu-Thr-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-，

9、一种根据权利要求8所述的源于神经的转谷氨酰胺酶，该酶将哺乳动物IL-2转变为具有少突神经胶质细胞包毒活性的二聚IL-2。

10、根据权利要求8所述的源于神经的转谷氨酰胺酶，该酶将鼠重组IL-2转变为具有少突神经胶质细胞胞毒活性的二聚IL-2。

11、根据权利要求8所述的源于神经的转谷氨酰胺酶，该酶将人重组IL-2转变为具有少突神经胶质细胞胞毒活性的二聚IL-2。

12、一种生产具有少突神经胶质细胞胞毒活性的二聚IL-2的酶学方法，该方法包括将IL-2与一种转谷氨酰胺酶一起保温。

13、一种生产具有少突神经胶质细胞胞毒活性的二聚体IL-2的酶学方法，包括将IL-2与权利要求1至12的任何一项所述的转谷氨酰胺酶一起保温。

14、根据权利要求13所说的方法，其中IL-2是哺乳动物IL-2。

15、根据权利要求13或14所述的方法，其中IL-2是重组鼠IL-2。

16、根据权利要求13或14所述的方法，其中IL-2是重组入IL-2。

17、由权利要求12至16任何一项所述方法获得的具有少突神经胶质细胞胞毒活性的二聚IL-2。

18、由权利要求12至16任何一项所述方法获得的具有少突神经胶质细胞胞毒活性的哺乳动物二聚IL-2。

19、由权利要求12至16任何一项所述方法获得的具有少突神经胶质细胞胞毒活性的人二聚IL-2。