[发明专利]修饰的血小板因子-4

权利要求书

1.氨基酸顺序为NH2-Ser-Gln-Val-Arg-Pro-Arg-His-Ile-Thr-Ser-Leu-Glu-Val-Ile-Lys-Ala-Gly-pro-His-Cys-Pro-Thr-Ala-Gln-Leu-Ile-Ala-Thr-Leu-Lys-Asn-Gly-Arg-Lys-Ile-Cys-Leu-Asp-Leu-Gln-Ala-Pro-Leu-Tyr-Lys-Lys-Ile-Ile-Lys-Lys-Leu-Leu-Glu-Ser-COOH的修饰的血小板因子-4(MPF-4)。

2.裂解的血小板因子-4(CPF-4)，其氨基酸顺序为NH2-Ser-Gln-Val-Arg-Pro-Arg-His-Ile-Thr-Ser-Leu-Glu-Val-Ile-Lys-Ala-Gly-pro-His-Cys-Pro-Thr-Ala-Gln-Leu-Ile-Ala-Thr-Leu-Lys-Asn-Gly-Arg-Lys-Ile-Cys-Leu-Asp-Leu-Gln-Ala-Pro-Leu-Tyr-Lys-Lys-Ile-Ile-Lys-Lys-Leu-Leu-Glu-Ser-COOH，它以二硫键与氨基酸顺序为NH2-Glu-Ala-Glu-Glu-Asp-Gly-Asp-Leu-Gln-Cys-Leu-Cys-Val-Lys-Thr-Thr-COOH的第二个蛋白连接，即MPF-4的Cys-20与第二个蛋白的Cys-10和MPF-4的Cys-36与第二个蛋白的Cys-12以二硫键合。

3.一种用于抑制血管形成的药物制剂，该制剂含有作为活性成分的MPF-4和一种或多种可药用的载体、赋形剂或稀释剂。

4.一种用于抑制血管形成的药物制剂，该制剂含有作为活性成分的CPF-4和一种或多种可药用的载体、赋形剂或稀释剂。

5.MPF-4用于制备血管形成抑制剂。

6.CPF-4用于制备血管形成抑制剂。

7.如权利要求1和2中任何一项所述的MPF-4或CPF-4的制备方法，包括：

a)在补充了20μg/ml脂多糖的无血清基本培养基中培养外周血淋巴细胞，提供含有MPF-4或CPF-4的液体混合物；

b)将该混合物上到反相纯化柱上并收集用30-50％乙腈洗脱下来的第一部分洗脱液；

c)将从b)中收集的洗脱液与肝素亲合树脂接触，使MPF-4或CPF-4与肝素亲合树脂结合并从收集的洗脱液中除去与MPF-4或CPF-4结合的树脂；

d)用0.7M到2.0M NaCl从肝素亲合树脂中将第二部分洗脱液洗脱下来；

e)将由d)中得到的第二部分洗脱液上样到第二根反相分析高压液相色谱柱，同时在220nm波长下监测；

f)根据生物活性和220nm波长处的吸收，收集含有MPF-4或CPF-4的级分。