[发明专利]家畜口蹄疫病毒多肽疫苗及其制备方法无效
| 申请号: | 93112596.0 | 申请日: | 1993-10-21 |
| 公开(公告)号: | CN1054544C | 公开(公告)日: | 2000-07-19 |
| 发明(设计)人: | 郑兆鑫;徐泉兴;毛昌群;尤永进;金建平;周智爱;郭杰炎;赵洪兴;严维耀;盛祖恬 | 申请(专利权)人: | 复旦大学;上海畜牧兽医研究所 |
| 主分类号: | A61K39/135 | 分类号: | A61K39/135;C12P21/02 |
| 代理公司: | 复旦大学专利事务所 | 代理人: | 姚静芳 |
| 地址: | 20043*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 家畜 口蹄疫病毒 多肽 疫苗 及其 制备 方法 | ||
1.一种家畜口蹄疫病毒多肽疫苗,是口蹄疫病毒毒株编码VPI蛋白中有免疫原性的包含有20个氨基酸和14个氨基酸的DNA序列,其特征在于该多肽疫苗是由DNA编码,由20个氨基酸和14个氨基的DNA序列串联成的编码20肽--14肽--20肽基因,其间的DNA连接序列共编码13个氨基酸,它的核苷酸排列是:AATTCATGGTACCAAACCTGCGTGGTGACCTGCAGGTACTTGCTCAGAAAGTTGC
GTACCATGGT TTGGACGCACCACTGGACGTCCATGAACGAGTCTTTCAACGTCGTACTCTGCCACCCGGGCGTCACAAACAGAAAATCGTAGCTCCAGTAAAACAGACTAGCATGAGACGGTGGGCCCGCAGTGTTTGTCTTTTA GCATCGAGGTCATT TTGT CTGACTGCAATTCGACCTCGAATTCATGGTACCCTCGAGGGTACCAAACCTGCGTGGTGACCGACGTTAAGCTGGAGCTTAAGTACCATGGGAGCTCCCATGGTTTGGACGCACCACTGGTGCAGGTACTTGCTCAGAAAGTTGCTCGTACTCTGCCATGAGACGTCCATGAACGAGTCTTTCAACGAGCATGAGACGGTACTCCTAG该种具有免疫原性多肽氨基酸序列是:
Val Pro Asn Leu Arg Gly Asp Leu Gln Val Leu Ala GlnLys Val Ala Arg Thr Leu Pro Pro Gly Arg His Lys Gln Lys Ile ValAla Pro Val Lys Gln Thr Leu Gln Phe Glu Leu Glu Phe Met Val ProSer Arg Val Pro Asn Leu Arg Gly Asp Leu Gln Val Leu Ala Gln LysVal Ala Arg Thr Leu Pro
2.根据权利要求1所述的家畜口蹄疫病毒多肽苗,其特征在于疫苗蛋白的分子量是30-140KDa。
3.一种家畜口蹄疫病毒多肽疫苗的制备方法,包括基因重组,重组融合蛋白的制备,其特征在于:(1)用化学合成的方法合成编码141-160位氨基酸和200-213位氨基酸的小肽基因,在 DNA水平上以串联方式连接,同时将编码上述小肽的DNA片段与半乳糖苷酶基因 或乙肝病毒核心抗原基因串联在一起;(2)将上述基因插入质粒载体;(3)将上述重组质粒转入细菌表达,得到菌株;(4)将菌株置于营养丰富的培养基中发酵,发酵温度30-37℃,发酵时间9-24小时,发 酵液中加入浓度为50-100ug/ml的氨苄青霉素,发酵完毕,经离心,粉碎细胞,再 离心即可。
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