[发明专利]分离和克隆有酪氨酸-磷酸酶活性的蛋白质

权利要求书

1、其细胞外区域包括Arg-Gly-Asp顺序的哺乳动物受体型蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTP酶)或其功能衍生物。

2、根据权利要求1的PTP酶，其为天然来源的，并且基本上没有与之天然有关联的其他蛋白质。

3、根据权利要求1或2的PTP酶，其基本上具有图1a或1b中所示的氨基酸顺序或其功能衍生物。

4、包含与载体多肽融合的根据权利要求1，2或3的PTP酶或其功能衍生物的融合蛋白质。

5、基本上由编码根据权利要求1之PTP酶或其功能衍生物的核苷酸顺序组成的DNA分子。

6、根据权利要求5的DNA分子，其为cDNA分子。

7、根据权利要求5的DNA分子，其为基因组DNA分子。

8、根据权利要求5至7中任一项的DNA分子，其中编码载体多肽的核苷酸顺序连接到所说的编码PTP酶或其功能衍生物的顺序上。

9、根据权利要求4的融合蛋白质或根据权利要求8的DNA分子，其中载体多肽包括一个或多个葡萄球菌蛋白A的IgG结合区。

10、含有根据权利要求5至9中任一项的DNA分子的表达载体。

11、根据权利要求10的表达载体转化的宿主。

12、根据权利要求11的宿主，其为真核宿主。

13、根据权利要求11的宿主，其为原核宿主。

14、根据权利要求13的宿主，其为大肠杆菌。

15、制备根据权利要求1的PTP酶或其功能衍生物的方法，该方法包括：

（ⅰ）提供处于能使PTP酶或其功能衍生物得以表达之条件下的根据权利要求11至14中之任一项的宿主;和

（ⅱ）纯化如此得到的PTP酶或其功能衍生物。

16、根据权利要求15的方法，其中所说的宿主是按下述步骤制备的：

（a）分离基本上由编码所说的PTP酶或其功能衍生物的核苷酸顺序组成的DNA分子;

（b）将所说的DNA分子插入到适当的表达载体中;和

（c）用所说的表达载体转化适当的宿主。

17、鉴定能刺激或抑制根据权利要求1，2或3的PTP酶或其功能衍生物之酶促活性的化合物的方法，该方法包括：

（a）使化合物与纯的膜制剂或完整的活的或固定的细胞形式的PTP酶或其功能衍生物接触;

（b）将步骤（a）的混合物保温足够长时间;和

（c）将步骤（a）之混合物的酶促活性与不加化合物保温的PTP酶或其功能衍生物的酶促活性相比较，从而确定该化合物是否刺激或抑制上述活性。

18、能够与根据权利要求1，2或3的PTP酶或其功能衍生物结合的多克隆或单克隆抗体。

19、检测试验样品中的根据权利要求1的PTP酶或其功能衍生物的方法，该方法包括使试验样品与根据权利要求18的抗体接触，并检测结合到PTP酶或其功能衍生物上的抗体的量。

20、检测试验样品中的编码根据权利要求1的PTP酶或其功能衍生物之mRNA的方法，该方法包括使存在于试验样品中的mRNA与基本上由图1所示顺序组成的DNA探针杂交，并检测所得DNA∶mRNA杂交体的量。