[发明专利]新的抗肿瘤细胞激活素无效
| 申请号： | 93106355.8 | 申请日： | 1993-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN1068335C | 公开（公告）日： | 2001-07-11 |
| 发明（设计）人： | 巴拉特·阿加沃 | 申请（专利权）人： | 研究发展基金会 |
| 主分类号： | C07K14/52 | 分类号： | C07K14/52;C07K1/00;A61K38/18 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所 | 代理人： | 刘立平 |
| 地址： | 美国内*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 肿瘤 细胞 激活 | ||
1、一种分离纯化的人瘤抑制素蛋白质，所述蛋白质由人成红细胞样细胞K-562分泌，在SDS-P AGE上其分子量为28kDa，在pH2-10、温度4-80℃的条件下是稳定的，并显示抗肿瘤活性。
2、一种制备人瘤抑制素的方法，包含以下步骤：
培养人成红细胞样细胞K-562；
在100ng/ml佛波醇酯中37℃培养48小时的上述细胞中诱导人瘤抑制素产生，所述瘤抑制素在SDS-PAGE上的分子量为28kDa，在pH2-10、温度4-80℃的条件下是稳定的，并显示抗肿瘤活性；
采集条件细胞上清液；及
纯化瘤抑制素，即经0.22微米滤器过滤所述上清液，在10,000分子量切分膜上进行超滤以浓缩所述蛋白质，进行透析改变缓冲液为20mM TrisHCl,pH8.0，用DEAE Affigel蓝色谱、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳及反相高效液相色谱法分离所述蛋白质。
3、如权利要求2所述的方法，进一步包括浓缩上清液。
4、如权利要求2所述的方法，进一步包括用佛波醇酯提高瘤抑制素的生产。
5、如权利要求2所述的方法，其中所述的细胞在RPMP1640培养基中培养。
6、如权利要求2所述的方法，其中瘤抑制素的产生是在无血清培养基中诱导的。
7、一种纯化人瘤抑制素的方法，包括步骤如下：
超滤含有人瘤抑制素的条件细胞上清液；
渗析超滤的上清液；
进行DEAE Affigel蓝色谱；
进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳和反相高效液相色谱。
8、一种药用组合物，包含权利要求1所述的人瘤抑制素和医药上可接受的载体。
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