[发明专利]全血样中纤维蛋白原的定量

说明书

本发明涉及全血样中血纤维蛋白原含量的定量方法。具体地，本发明涉及到快速、准确直观地测定离心血样中纤维蛋白原含量的方法。

纤维蛋白原是主要的血浆蛋白，是正常血凝所必需的，血液中纤维蛋白原的含量与血液形成血块的能力成正比。在血块形成过程中，纤维蛋白原转化成纤维蛋白，因此纤维蛋白原的缺乏将导致纤维蛋白形成不足和凝血不足。

血浆中纤维蛋白原水平的不足可能是由纤维蛋白原生成减少所引起的，如肝衰竭，或先天血纤维蛋白原过少。弥漫性血管内血凝(一种病理状态)也使用于形成血块的纤维蛋白原的消耗量高于正常值。显然，纤维蛋白原不足可引起出血过多。

血中过量的纤维蛋白原也是不正常的，通常与炎症状态有关。血中高含量的纤维蛋白原容易发生血凝固性过高，这也是不受欢迎的。还发现怀孕妇女纤维蛋白原水平显著升高。

据测定发现血中纤维蛋白原浓度增高是心血管病的一个危险的因素。

由上可见，血中纤维蛋白原水平的检测是确定患者健康情况的有效方法，也可用做预报身体条件异常的工具。因此血纤维蛋白原含量分析是用于正常患者检查或体格检查早期警告的有价值的方法。

有几种定量分析血浆纤维蛋白原的适用方法。目前所用的方法需要血浆与血细胞完全分离，并且大部分需要将血浆中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白。随后。纤维蛋白经重量分析，浊度分析或化学分析进行定量。血浆中纤维蛋白原的免疫及化学/物理沉淀定量分析也包括在前述方法中。

Millar于1971年发表的方法，涉及到测定离心的血浆部分中加热沉淀的纤维蛋白原谱带的方法。纤维蛋白原的加热沉淀在Millar及其它人的文章中有述，包括Fredericq在1877年；Schulz在1955年；Goodwin在1965年及Low等人在1967年。血浆与血样中其它成份分离后，将血浆吸入到微量血细胞比容管，在56℃水浴中加热3分钟，随后将加热的样品离心，在血浆中形成纤维蛋白沉淀带。纤维蛋白带的长度除以原血浆柱的长度可得到样品中纤维蛋白原的含量。本方法将聚集沉淀的纤维蛋白的体积百分比直接转化为纤维蛋白原浓度，并假设以mg/100ml血浆表示的血浆中纤维蛋白体积浓度等于百分之一(1.0％)的血样中纤维蛋白原浓度，以mg/100ml血表示。应用前述方法，加热并离心后，上清血浆中不含有纤维蛋白原，经测定可知，加热过程中，其它正常的血浆蛋白不被沉淀。

除了Low等人的方法(前面已有介绍并在以后详述)外，前述的定量测定血样中纤维蛋白原的方法相对较复杂且费时，因为需要将全血样预处理，使血浆与其它血液成份分离，随后从其它血液成份中分离出。分离后的血浆转移到其它容器，进一步处理并分析。测定纤维蛋白原的全部实验过程的复杂性表明，该分析必须在医学实验室中进行，而不能在医生办公室方便地进行。

Low等人1967年的方法，则不需进行从血浆中分离形成的血液成分的预处理步骤，不需从淡黄色外层中分离沉淀的纤维蛋白原，其位于聚集的红血细胞上层，Low等人的方法如Millar的方法所述，包括将预先被离心的含有血样的微量血细胞比容管于56℃加热3分钟，该管以12,000G的转速再离心3分钟，热沉淀的纤维蛋白原直接落于相似颜色淡黄色外层的上层。

本发明涉及到的定量分析血样中纤维蛋白原含量的方法为，使用血样管和测定白血细胞计数的先有技术中所披露的浮标经简单离心过程进行。所用的装置和一般细胞计数测定方法在下列美国专利中有介绍：美国专利：4,027,660(1977年6月7日批准)；4,077,396(1978年3月7日比准)；4,082,085(1978年4月4日批准)和4,137,755(1979年2月6日批准)。将其全部收载于此。作为参考还批准了这些发明者的其它一些专利，他们使用试管和浮标装置进行了其它的血液分析和其它样品的分析。