[发明专利]提取超氧化物歧化酶复合物的方法无效
申请号: | 89100427.0 | 申请日: | 1989-02-02 |
公开(公告)号: | CN1020734C | 公开(公告)日: | 1993-05-19 |
发明(设计)人: | 丁克祥 | 申请(专利权)人: | 海军工程学院门诊部 |
主分类号: | C07K15/06 | 分类号: | C07K15/06;C07K3/02 |
代理公司: | 中国人民解放军总后勤部专利服务中心 | 代理人: | 周自清 |
地址: | 湖北省武汉*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 提取 超氧化物歧化酶 复合物 方法 | ||
1、一种从人和动物血液提取超氧化物歧化酶复合物,包括红细胞、白细胞、血小板中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)的方法,其特征在于,所使用的工艺流程为,(1)使用3.13%-3.8%枸橼酸钠溶液对血液抗凝;(2)使用2%-5%氯化钠溶液洗涤血细胞;(3)综合使用低渗、低温、剧烈搅拌,合并冰晶刺破的机械方法完成溶血;(4)加乙醇和三氯甲烷去除血红蛋白;(5)减压蒸馏去除乙醇和三氯甲烷;(6)超滤浓缩;(7)调整抽提液的酸硷度至等电点附近(PH5.6-6.8),在-20℃--10℃条件下加入丙酮,使酶沉淀;(8)以丙酮脱水;(9)乙醚抽干。
2、根据权力要求1,其特征在于,在对血液抗凝前,先调整抗凝剂的酸硷度至PH6.4-7.6。
3、根据权力要求1,其特征在于,在加入有机溶剂,使血红蛋白变性,去除血红蛋白时,是在-5℃-0℃的低温下连续搅拌。
4、根据权力要求1,其特征在于,应用减压蒸馏法,抽提速率为0.8-1.2升/秒,蒸馏温度为30℃-45℃,持续2-4小时,去除乙醇和三氯甲烷。
5、根据权力要求1,其特征在于,用75%丙酮脱去部分水分、再加入纯丙酮继续脱水、用乙醚抽干的方法获取SOD复合物的产品。
6、根据权力要求1,其特征在于,在整个生产流程中,提取液的温度都保持在10℃以下。
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