[发明专利]抗促卵泡激素单克隆抗体及其制备和使用无效
申请号: | 89100233.2 | 申请日: | 1989-01-12 |
公开(公告)号: | CN1035128A | 公开(公告)日: | 1989-08-30 |
发明(设计)人: | 罗德尼·约翰·菲德斯 | 申请(专利权)人: | 邦奇(澳大利亚)有限公司 |
主分类号: | C12N15/00 | 分类号: | C12N15/00;C12N5/00;C12P21/00;A61K37/38;A61K39/395 |
代理公司: | 中国专利代理有限公司 | 代理人: | 孟八一,林玉贞 |
地址: | 澳大利亚*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 卵泡 激素 单克隆抗体 及其 制备 使用 | ||
1、一种抗促卵泡激素(FSH)的单克隆抗体的制备方法,该方法包括:
提供一种能产生抗FSH抗体的B细胞和一种骨髓瘤细胞;
使B细胞与骨髓瘤细胞融合;
并繁殖融合生成的杂种瘤细胞;以及
采集所述杂种瘤细胞产生的抗体。
2、根据权利要求1的方法,其中能产生抗体的B细胞可从用羊促卵泡激素(oFSH)免疫的动物或从其致免疫的组织中获得;以及
骨髓瘤细胞系是一种NS-I型骨髓瘤细胞系。
3、根据权利要求2的方法,其中融合步骤包括在选自仙台(Sendai)病毒和聚乙二醇的促融合剂存在下,将体细胞与骨髓瘤细胞混合。
4、根据权利要求3的方法,其中杂种瘤细胞繁殖步骤包括:
利用放射免疫测定法和免疫组织法测定产生抗体的杂种瘤细胞;
接着将选择融合的细胞杂种无性繁殖成为产生抗体的细胞系;以及
每个细胞系在体内或体外繁殖。
5、产生抗促卵泡激素的单克隆抗体的连续细胞系包括由能产生抗促卵泡激素抗体的B细胞与骨髓瘤细胞融合而形成的杂种瘤细胞。
6、通过NS-I骨髓瘤细胞与用羊促卵泡激素免疫的BALA/C小鼠体中得到的B细胞融合,形成根据权利要求5所述的连续细胞系。
7、连续细胞系选自上述的BFR87-70和BFR87-124。
8、由产生抗促卵泡激素单克隆抗体的连续细胞系产生的抗促卵泡激素单克隆抗体包括能产生抗促卵泡激素抗体的B细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂种瘤细胞。
9、由选自上述的BFR87-70和BFR87-124连续细胞系产生的单克隆抗体。
10、一种纯化促卵泡激素(FSH)的方法,该方法包括提供一个不纯的FSH源和与一种基质结合的抗FSH的单克隆抗体;将不纯的FSH通过单克隆抗体基质,以俘获FSH,以及将俘获的FSH从单克隆抗体基质洗脱下来。
11、根据权利要求10的方法,其中促卵泡激素是一种羊促卵泡激素(oFSH);与基质结合的单克隆抗体选自上述的BFR87-70和BFR87-124。
12、根据权利要求11的方法,其中所述基质是色谱凝胶,所述洗脱步骤包括用0.1M柠檬酸盐/柠檬酸溶液分阶洗脱。
13、用权利要求10的方法制备纯促卵泡激素。
14、一种诱发雌性动物动情和/或增强其生殖力的方法,该方法包括给动物施以权利要求13所述的有效量的纯化促卵泡激素。
15、根据权利要求14的方法,其中处理动物是绵羊或山羊,纯FSH的给药量约2至10iu。
16、根据权利要求15的方法,还包括在给予动物FSH的同时或之后,再施以约0.25-1.0mg由杂种瘤细胞系生成的抗FSH的单克隆抗体。
17、根据权利要求14的方法,其中处理动物是奶牛,施用的FSH的量约为2至20iu。
18、根据权利要求17的方法,还包括施以FSH的同时或之后,对动物施以约1.0至3.0mg由杂种瘤细胞系生成的抗FSH的纯单克隆抗体。
19、一种在雌性动物一个动情期内显著增加产卵数的方法,该方法包括给动物施以根据权利要求13所述的有效量纯FSH。
20、根据权利要求19的方法,其中处理动物是绵羊或山羊,施用的FSH的量约为4至20iu。
21、根据权利要求20的方法,还包括施以FSH的同时或之后,对动物施以约0.5至2.0mg由杂种瘤细胞系生成的抗FSH的纯单克隆抗体。
22、根据权利要求19的方法,其中所述动物是奶牛,施用的FSH的量为4至20iu。
23、根据权利要求22的方法,还包括施以FSH的同时或之后,对动物以由杂种瘤细胞系生成的抗FSH的纯单克隆抗体。
24、一种增加排卵使雌性动物双生的方法,该方法包括对动物施以根据权利要求13所述的有效量纯FSH。
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