[发明专利]肽的制造方法

权利要求书

1．一种在乳液中生产含有来源于动物的多肽的物质的方法，该方法包括：

(a)在体外在一种遗传构建体中掺入：

(ⅰ)编码所述多肽的DNA序列；和

(ⅱ)在成年的雌性胎盘哺乳动物的乳腺中指导编码所述多肽的DNA序列表达的，来自β-乳球蛋白基因的DNA序列；

(b)将该遗传构建体掺入非人类胎盘哺乳动物的种系中；

(c)任意选择地繁殖一种雌性哺乳动物，该哺乳动物的种系含有从步骤(b)中产生的哺乳动物的遗传构建体；

(d)在由步骤(b)或(c)中产生的成年雌性胎盘哺乳动物的乳腺中生产乳液；以及

(e)收集在步骤(d)中产生的乳液。

2．根据权利要求1所述的方法，其中含多肽的物质是随后从成年雌性哺乳动物的乳液中回收的。

3．根据权利要求2所述的方法，其中含多肽的物质是在转录后修饰之后从乳液中回收的。

4．根据权利要求1的所述的方法，其中含多肽的物质是人体血液蛋白质。

5．根据权利要求1所述的方法，其中含多肽的物质是肽激素。

6．根据权利要求1所述的方法，其中含多肽的物质是血液凝固因子或血液凝固因子的亚基。

7．根据权利要求1所述的方法，其中含多肽的物质是一种酶。

8．根据权利要求1所述的方法，其中成年雌性非人类哺乳动物是用一种方法产生的，该方法包括：

(a)在体外在一种遗传构建体中掺入：

(ⅰ)编码所述多肽的DNA序列；和

(ⅱ)在成年的雌性哺乳动物的乳腺中指导编码所述多肽的DNA序列表达的，来自β-乳球蛋白基因的DNA序列；

(b)通过注射入哺乳动物的胚胎细胞或受精卵中而将遗传构建体掺入哺乳动物的种系中；以及

(c)使已受注射的受精卵或胚胎发育成成年的哺乳动物；以及

(d)任意选择地繁殖一种雌性哺乳动物，其种系含有从步骤(c)中产生的哺乳动物的遗传构建体。

9．根据权利要求8所述的方法，其中向两细胞胚胎的核进行注射。

10．根据权利要求8所述的方法，其中将直链DNA分子注射到卵的原核或核中。

11．根据权利要求1所述的方法，其中哺乳动物是家畜哺乳动物。

12．根据权利要求11所述的方法，其中哺乳动物选自Suidae科，Ovis属，Capra属，以及Bos属。

13．根据权利要求11所述的方法，其中哺乳动物是奶羊。

14．根据权利要求1所述的方法，其中β-乳球蛋白是羊的β-乳球蛋白。

15．根据权利要求1所述的方法，其中遗传构建体包含一种启动子。

16．根据权利要求1所述的方法，其中遗传构建体包含一个转录起始位点。

17．根据权利要求1所述的方法，其中遗传构建体包含一个或多个β-乳球蛋白的远侧的5＇调节序列。

18．根据权利要求1所述的方法，其中遗传构建体包含结构性β-乳球蛋白质基因序列，该序列可任意选择地包含内部调节序列。

19．根据权利要求1所述的方法，其中遗传构建体包含β-乳球蛋白3′侧翼序列。

20．根据权利要求1所述的方法，其中遗传构建体包含插至编码β-乳球蛋白基因的第一个外显子中的，编码所述来源于动物的多肽或酶的cDNA序列。

21．根据权利要求1所述的方法，其中遗传构建体包含一些编码β-乳球蛋白基因的5′侧翼序列。

22．根据权利要求1所述的方法，其中遗传构建体含有所述来源于动物的多肽或酶的信号肽。

23．根据权利要求22所述的方法，其中将编码β-乳球蛋白的信号肽的序列准确地与编码所生产的物质中成熟多肽的N-末端氨基酸的DNA序列融合。

24．根据权利要求1所述的方法，其中DNA序列的3′端在它的终止密码子之后，但是在它自己的多聚腺苷酸添加位点之前终止。