[发明专利]核酸组合物、目标微生物检测试剂盒及其应用

说明书

本申请涉及一种核酸组合物、目标微生物检测试剂盒及其应用，核酸组合物，包括目标微生物的核酸扩增引物，目标微生物包括扣囊复膜酵母、横梗霉和黄曲霉中的至少一种；其中，扣囊复膜酵母的核酸扩增引物包括如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示序列的引物对；横梗霉的核酸扩增引物包括如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示序列的引物对；黄曲霉的核酸扩增引物包括如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示序列的引物对。本申请的核酸组合物能够用于对各个制曲阶段的大曲样本中的目标微生物进行定量分析，进而区分整优曲和整次曲，从而实现快速、客观地检测各个制曲阶段的大曲质量。

技术领域

本申请涉及生物检测技术领域，具体而言，涉及一种核酸组合物、目标微生物检测试剂盒及其应用。

背景技术

大曲是用来酿酒的一种原料，又称块曲或砖曲，以大麦、小麦、豌豆等为原料，经过粉碎，加水混捏，压成曲醅，形似砖块，大小不等，让自然界各种微生物在上面生长而制成。

大曲是大曲酒酿造中的糖化发酵剂，含有多种微生物菌系和各种酿酒酶系。在制曲和酿酒过程中，这些微生物的生长与繁殖，形成了种类繁多的代谢产物，进而赋予各种大曲酒独特的风格与特色。

为了保证大曲酒发酵过程的正常进行，大曲品质稳定至关重要。目前大曲发酵过程质量评价主要依靠制曲师傅基于曲砖外观形态的主观判断，缺少科学的客观评价指标。

因此，如何客观、快速判断大曲发酵过程的质量是大曲质量控制的难点。

发明内容

为了解决上述问题，客观、快速检测发酵过程的大曲质量，提高大曲品质的稳定性，本申请的第一目的在于提供一种核酸组合物，包括目标微生物的核酸扩增引物，目标微生物包括扣囊复膜酵母、横梗霉和黄曲霉中的至少一种；

其中，扣囊复膜酵母的核酸扩增引物包括如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示序列的引物对；

横梗霉的核酸扩增引物包括如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示序列的引物对；

黄曲霉的核酸扩增引物包括如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示序列的引物对。

本申请的第二目的在于提供一种分离的核酸，分离的核酸包括权利要求1的核酸组合物的扩增片段；

可选地，分离的核酸为质粒。

本申请的第三目的在于提供上述核酸组合物和/或上述分离的核酸在制备目标微生物检测试剂盒中的应用。

在其中一个实施例中，试剂盒用于检测目标微生物的核酸含量；

可选地，试剂盒用于执行以下方法中的任意一种：

实时荧光定量PCR和数字PCR。

在其中一个实施例中，试剂盒中的组分满足以下特征(1)和(2)中的至少一个：

(1)试剂盒还包括DNA提取试剂和PCR反应试剂中的至少一种；

(2)分离的核酸的浓度为10³copies/μL～10¹²copies/μL。

本申请的第四目的在于提供一种根据上述应用制备的试剂盒。

本申请的第五目的在于提供一种根据上述核酸组合物、上述分离的核酸、或者上述试剂盒在检测大曲质量中的应用。

本申请的第六目的在于提供一种检测大曲质量的方法，方法包括：

采用上述核酸组合物、上述分离的核酸、或者上述试剂盒检测待测大曲样本中的目标微生物，待测大曲样本为制曲阶段的大曲样本；