[发明专利]一种抗HA标签的单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开了一种抗HA标签的单克隆抗体及其应用，包括重链CDR1、重链CDR2和重链CDR3，以及轻链CDR1、轻链CDR2和轻链CDR3；重链CDR1包括SEQ ID NO:1所示氨基酸序列或由其组成；重链CDR2包括SEQ ID NO:2所示序列或由其组成；重链CDR3包括SEQ ID NO:3所示序列或由其组成；轻链CDR1包括SEQ ID NO:4所示序列或由其组成；轻链CDR2包括SEQ ID NO:5所示序列或由其组成；轻链CDR3包括SEQ ID NO:6所示序列或由其组成；其效价可达1.48×10supgt;6/supgt;，亲和力达1.333E‑8，抗体活性高，具有极大地应用潜力。

技术领域

本发明属于分子免疫学领域，更具体地，涉及一种抗HA标签的单克隆抗体及其应用。

背景技术

HA标签(HA-tag)是一种基于人流感病毒血凝素(HA)抗原的蛋白标签，其化学本质是一段来自于流感病毒血凝素(HA)蛋白第98～106位氨基酸的短序列(氨基酸序列：YPYDVPDYA)，其分子量为1.1KDa，是目前广泛应用的表位标签之一。一般采用分子生物学手段将HA标签融合到目的蛋白的C端或N端，再利用HA标签抗体特异识别C末端或N末端带有HA标签的融合蛋白，通常可用于检测和HA tag融合表达蛋白的表达、细胞内定位，以及纯化、定性或定量检测HAtag融合表达蛋白等，即HA标签抗体可用于HA标记的靶蛋白的检测、分离和纯化，而无需蛋白特异性抗体或探针。目前，HA标签抗体是蛋白质表达和细胞生物学研究中最常用的抗体之一。但是，目前商品化抗HA标签蛋白的单克隆抗体种类较少，且价格十分昂贵。因此，研究更多的抗HA标签的单克隆抗体，在融合蛋白质的表达检测、定位、免疫吸附及分离纯化中具有广阔的应用前景。

发明内容

针对现有技术的以上缺陷或改进需求，本发明提供了一种抗HA标签的单克隆抗体及其应用，其目的在于通过流感病毒血凝素(HA)的氨基酸残基YPYDVPDYA (98-106)的合成肽与钥孔血蓝蛋白(Keyhole Limpet Hemocyanin,KLH)偶联作为抗原，刺激小鼠产生抗体，在其体内发现一种高效价的HA抗体，通过该抗体可变区基因克隆及测序，获得该抗体重链和轻链互补决定区的氨基酸序列，以此为基础制备抗HA标签的单克隆抗体，由此解决现有抗HA标签蛋白的单克隆抗体种类较少，价格昂贵的技术问题。

为实现上述目的，按照本发明的一个方面，提供了一种抗HA标签的单克隆抗体，其包括3个重链的互补决定区：重链CDR1、重链CDR2和重链CDR3，以及3个轻链的互补决定区：轻链CDR1、轻链CDR2和轻链CDR3；

所述重链CDR1包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列S-Y-G-M-S或由其组成；

所述重链CDR2包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列Y-I-S-D-G-G-V-R-T-Y-Y-P-D-T-I-K-G或由其组成；

所述重链CDR3包括SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列H-R-G-Y-D-G-G-M-D-Y或由其组成；

所述轻链CDR1包括SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列R-A-S-A-S-V-I-A-M-H或由其组成；

所述轻链CDR2包括SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列A-T-S-S-L-A-S或由其组成；

所述轻链CDR3包括SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列Q-H-W-S-R-N-P-L-T或由其组成。

优选地，所述抗HA标签的单克隆抗体，其所述抗体，其重链可变区包括以下氨基酸序列：

包括如SEQ ID NO:7，8，9，10所示的氨基酸序列或由其组成、与SEQ ID NO:7，8，9，10所示的序列具有至少80％，85％，90％同一性的序列、或者与SEQ ID NO:7，8，9，10所示的氨基酸序列相比具有一个或多个氨基酸突变的序列。