[发明专利]小鼠胚胎组织芯片免疫荧光染色试剂盒在审
申请号: | 202310548019.9 | 申请日: | 2023-05-16 |
公开(公告)号: | CN116643048A | 公开(公告)日: | 2023-08-25 |
发明(设计)人: | 黄杰 | 申请(专利权)人: | 重庆医科大学国际体外诊断研究院;贝拓(重庆)生物技术研究院有限公司 |
主分类号: | G01N33/58 | 分类号: | G01N33/58;G01N33/533 |
代理公司: | 重庆硕睿铭达知识产权代理事务所(普通合伙) 50294 | 代理人: | 李凤娇 |
地址: | 400000 重庆市沙*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 小鼠 胚胎 组织 芯片 免疫 荧光 染色 试剂盒 | ||
本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种小鼠胚胎组织芯片免疫荧光染色试剂盒,包括选择适龄雌雄小鼠数只,检查小鼠外部生殖器官情况和动情期;按雌雄比例2:1或者1:1配笼饲养,得到多只孕鼠;选取胚龄7.5d‑18.5d的孕鼠,剥离蜕膜分离鼠胚,得到12种不同周期的鼠胚;利用方形孔板,固定组织,采集12种不同周期的鼠胚,并按照矢状面、冠状面和横断面排列在受体空白石蜡块中,制成石蜡组织芯片蜡块;对所述石蜡组织芯片蜡块进行切片后放置玻片上,得到小鼠胚胎组织芯片,通过五个小鼠胚胎组织芯片和免疫荧光染色试剂耗材组成试剂盒,解决了现有的小鼠染色试剂盒中没有小鼠胚胎芯片的问题。
技术领域
本发明涉及基因工程技术领域,尤其涉及一种小鼠胚胎组织芯片免疫荧光染色试剂盒。
背景技术
由于小鼠的基因序列与人类差不多,小鼠的胚胎组织是试验研究中常用的是动物模型,因此,小鼠可作为研究不同药物介导的免疫缺陷的模型,在科学研究中起着重要的作用。
而通过小鼠染色试剂盒代替对活体小鼠的研究在可以起到对小鼠进行研究的同时,可以避免小鼠在运输中死亡和逃跑的风险。
但现有的小鼠染色试剂盒中仅具有小鼠组织芯片,没有小鼠胚胎芯片,从而限制了对小鼠的研究的范围。
发明内容
本发明的目的在于提供一种小鼠胚胎组织芯片免疫荧光染色试剂盒,旨在解决现有的小鼠染色试剂盒中没有小鼠胚胎芯片的问题。
为实现上述目的,本发明提供了一种小鼠胚胎组织芯片免疫荧光染色试剂盒,包括五个小鼠胚胎组织芯片和免疫荧光染色试剂耗材,
所述免疫荧光染色试剂耗材包括免疫染色通透液、固定液、免疫染色一抗稀释液、洗涤液、封闭液、免疫荧光染色二抗稀释液、抗荧光淬灭封片液、免疫荧光染色二抗、免疫荧光染色一抗、山羊血清和盖玻片。
其中,所述免疫荧光染色二抗包括免疫荧光染色二抗-抗大鼠Cy3、免疫荧光染色二抗-抗人FITC、免疫荧光染色二抗-抗山羊Cy3、免疫荧光染色二抗-抗兔AlexaFluor350、免疫荧光染色二抗-抗兔AlexaFluor488、免疫荧光染色二抗-抗兔AlexaFluor555、免疫荧光染色二抗-抗兔AlexaFluor647、免疫荧光染色二抗-抗兔Cy3、免疫荧光染色二抗-抗兔FITC、免疫荧光染色二抗-抗小鼠AlexaFluor488、免疫荧光染色二抗-抗小鼠AlexaFluor555、免疫荧光染色二抗-抗小鼠AlexaFluor647、免疫荧光染色二抗-抗小鼠AlexaFluor350、免疫荧光染色二抗-抗小鼠Cy3和免疫荧光染色二抗-抗小鼠FITC中的任意一种或两种。
其中,所述小鼠胚胎组织芯片包括小鼠胚胎组织石蜡芯片和小鼠胚胎组织冰冻芯片中的任意一种。
其中,所述固定液包括免疫染色固定液和4%多聚甲醛固定液中的任意一种;
所述洗涤液包括免疫染色洗涤液和缓冲洗涤液;
所述封闭液包括免疫染色封闭液和缓冲封闭液。
其中,所述缓冲洗涤液的制备方法包括:
称取24.2g的三羟甲基氨基甲烷和80g氯化钠混合,得到混合溶液;
使用盐酸将所述混合溶液的pH至调节至7.6,得到调整溶液;
将1升的所述调整溶液按照1:9的比例用水稀释,得到三乙醇胺缓冲盐水溶液;
使用非离子型去垢剂将所述三乙醇胺缓冲盐水溶液的最终浓度调整为0.1%,得到缓冲洗涤液。
其中,所述缓冲封闭液的制备方法包括:
在100毫升的TBST缓冲液中加入5克山羊血清,溶解并混匀,得到缓冲封闭液。
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