[发明专利]基于液质联用技术同时测定强肝胶囊中多成分的方法和应用

说明书

本发明涉及一种基于液质联用技术测定强肝胶囊中多种成分含量的方法和应用，取强肝胶囊内容物，研磨，精密称定适量，加入溶剂提取，离心处理，摇匀，过滤，取续滤液后得到待测样品；将待测样品进行液质检测，液相的固定相是C18柱，流动相A是含0.1±0.02％%甲酸水溶液，流动相B是乙腈，采用梯度洗脱，流速为0.3~0.5mL/min，柱温为40±2℃，质谱分别采用正、负离子两种模式，电喷雾离子源，检测方式采用多反应离子监测模式。本发明所提供的检测方法经专属性、灵敏度等方法学验证，具有方法灵敏、准确、重现性较好的特点，为产品的质量控制提供了一种可靠的方法，且有利于提高患者的用药安全。

技术领域

本发明涉及中成药质量控制技术领域，尤其是涉及一种基于液质联用技术同时测定强肝胶囊中多成分的方法和应用。

背景技术

强肝胶囊来源于《中医大辞典·方剂分册》中的经典验方“强肝汤”。强肝胶囊是强肝汤的剂型改进药物，由茵陈等16味中药组成，具有清热利湿、补脾养血、益气解郁之功效，临床上主要用于慢性肝炎、早期肝硬化、脂肪肝，中毒性肝炎等肝病的治疗。

目前对强肝胶囊的临床研究相对较多，临床疗效显著，但是对其化学成分研究的相关报导较少，其物质基础尚不明确，对强肝胶囊的多种化学成分进行含量测定能够有效对其进行质量控制，从而保证其临床用药的安全性和有效性。

强肝胶囊作为一个中药复方，药味众多，成分复杂，有效成分较多，尤其某些成分含量较低，在其现行质量标准中，对于含量测定项，仅将芍药苷这一单一成分作为定量指标，仅单一指标的含量往往不能准确的反映复方的质量，难以达到真正意义上的质量控制。同时，茵陈、板蓝根作为强肝胶囊中的君药，其中的指标成分也并未在上述方法中得到控制，这会为强肝胶囊的质量带来隐患。目前本领域亟需一种针对于强肝胶囊多成分含量检测方法，为强肝胶囊的质量控制提供依据。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺陷，提供一种基于液质联用技术简便高效地检测强肝胶囊多种成分的方法和应用。

为实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：

本发明提供了一种基于液质联用技术同时测定强肝胶囊中多成分的方法，其包括如下步骤：

S1待测样品准备：取强肝胶囊内容物，研磨，精密称定适量，加入溶剂提取，离心处理，摇匀，过滤，取续滤液后得到待测样品；

S2标准曲线制备：

分别精密称取对羟基苯乙酮、原儿茶醛、水杨酸、原儿茶酸、邻苯二甲酸、没食子酸、咖啡酸、丹参素、绿原酸、新绿原酸、迷迭香酸、马钱苷酸、异绿原酸A、芍药苷、芍药内酯苷、丹酚酸B对照品适量，制备对照品溶液，取一定量各对照品溶液混合得到负离子化合物混合物对照品储备液；

分别精密称取GABA、L-脯氨酸、缬氨酸、L-亮氨酸、7-甲氧基香豆素、阿魏酸、胞苷、甘草素、异甘草素、腺苷、芒柄花素、二氢丹参酮I、毛蕊异黄酮、丹参酮IIA、当药苦苷、龙胆苦苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮苷、甘草次酸、泽泻醇A、6’-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、黄芪甲苷、甘草酸对照品适量，制备对照品溶液，取一定量各对照品溶液混合得到正离子化合物混合对照品储备液；

将对照品储备液进行稀释，得到不同浓度的负或正离子化合物混合对照品溶液，按照步骤S3的方法对制备的各浓度混合对照品溶液进行检测，记录峰面积，建立各成分的标准曲线；

S3 HPLC-QTRAP-MS/MS检测：将步骤S1得到的待测品进行高效液相质谱检测，所述高效液相的固定相为C18色谱柱，采用C18色谱柱，填料粒径为1.7～5μm；流动相：A为0.1±0.02％甲酸水溶液，B为乙腈，梯度洗脱；流速：0.3～0.5mL·min-1；柱温：40±2℃；所述质谱采用正负离子模式，电喷雾离子源，监测方式为多反应监测。