[发明专利]基于液质联用技术同时测定强肝胶囊中多成分的方法和应用

权利要求书

1.一种基于液质联用技术同时测定强肝胶囊中多成分的方法，其特征在于，其包括如下步骤：

S1待测样品准备：取强肝胶囊内容物，研磨，精密称定适量，加入溶剂提取，离心处理，摇匀，过滤，取续滤液后得到待测样品；

S2标准曲线制备：

分别精密称取对羟基苯乙酮、原儿茶醛、水杨酸、原儿茶酸、邻苯二甲酸、没食子酸、咖啡酸、丹参素、绿原酸、新绿原酸、迷迭香酸、马钱苷酸、异绿原酸A、芍药苷、芍药内酯苷、丹酚酸B对照品适量，制备对照品溶液，取一定量各对照品溶液混合得到负离子化合物混合物对照品储备液；

分别精密称取GABA、L-脯氨酸、缬氨酸、L-亮氨酸、7-甲氧基香豆素、阿魏酸、胞苷、甘草素、异甘草素、腺苷、芒柄花素、二氢丹参酮I、毛蕊异黄酮、丹参酮IIA、当药苦苷、龙胆苦苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮苷、甘草次酸、泽泻醇A、6’-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、黄芪甲苷、甘草酸对照品适量，制备对照品溶液，取一定量各对照品溶液混合得到正离子化合物混合对照品储备液；

将对照品储备液进行稀释，得到不同浓度的负或正离子化合物混合对照品溶液，按照步骤S3的方法对制备的各浓度混合对照品溶液进行检测，记录峰面积，建立各成分的标准曲线；

S3 HPLC-QTRAP-MS/MS检测：将步骤S1得到的待测品进行高效液相质谱检测，所述高效液相的固定相为C18色谱柱，采用C18色谱柱，填料粒径为1.7～5μm；流动相：A为0.1±0.02％甲酸水溶液，B为乙腈，梯度洗脱；流速：0.3～0.5mL·min-1；柱温：40±2℃；所述质谱采用正负离子模式，电喷雾离子源，监测方式为多反应监测。

2.根据权利要求1所述的一种基于液质联用技术同时测定强肝胶囊中多成分的方法，其特征在于，所述步骤S1中所选溶剂为10～100％的甲醇溶液。

3.根据权利要求1所述的一种基于液质联用技术同时测定强肝胶囊中多成分的方法，其特征在于，所述步骤S1中提取时的溶固比为20～50mL/g。

4.根据权利要求1所述的一种基于液质联用技术同时测定强肝胶囊中多成分的方法，其特征在于，所述步骤S1中提取为超声提取超声功率为200～300W；所述超声频率为30～50kHz。

5.根据权利要求1所述的一种基于液质联用技术同时测定强肝胶囊中多成分的方法，其特征在于，所述步骤S2中梯度洗脱中，正负模式梯度洗脱程序分开进行正负模式梯度洗脱程序分开进行，程序如下；

负离子模式下梯度洗脱条件：0～1min，98％A→85A％；1～6min，85％A→70A％；6～6.1min，70％A→2A％；6.1～7min，2％A→70A％；7～7.1min，70％A→98A％；7.1～8min，98％A。

正离子模式下梯度洗脱条件：0～1min，98％A→85A％；1～6min，85％A→70A％；6～6.1min，70％A→2A％；6.1～7min，2％A→70A％；7～7.1min，70％A→98A％；7.1～9min，98％A。

6.根据权利要求1所述的一种基于液质联用技术同时测定强肝胶囊中多成分的方法，其特征在于，所述步骤S3中质谱条件为源喷射电压(IS)：-4500/5500V；源温度(TEM)：550-700℃；雾化气压力(GS1，N2)：55.0-65.0psi；干燥气压力(GS2，N2)：60.0-70.0psi；气帘气压力(CUR，N2)：25.0-40.0psi。

7.根据权利要求1所述的一种基于液质联用技术同时测定强肝胶囊中多成分的方法，其特征在于所述步骤S3中，多反应监测参数如下