[发明专利]一种用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法

权利要求书

1.一种用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，包括：

将细胞均匀负载于片状固相载体上，电场处理后直接在培养基存在的条件下与CCK-8试剂共孵育以检测细胞增殖能力，且检测过程中不添加胰酶进行消化处理。

2.根据权利要求1所述的用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，所述片状固相载体的直径≤20cm。

3.根据权利要求2所述的用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，将细胞均匀负载固相载体上的方法包括：将细胞悬液均匀分布于所述片状固相载体表面，置于36℃～38℃饱和湿度培养箱中4h～6h待细胞完全贴壁后，补充培养基并置于36℃～38℃饱和湿度培养箱中培养8h～16h。

4.根据权利要求2所述的用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，所述孵育在孔中进行，将所述片状固相载体移入所述孔中并添加所述培养基以及所述CCK-8试剂。

5.根据权利要求4所述的用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，所述孔的直径为20cm～22cm，所述孔中添加200μl～400μl所述培养基。

6.根据权利要求1～5任一项所述的用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，所述孵育的时间为1.5～2小时。

7.根据权利要求6所述的用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，根据孵育后上清液的吸光度值确定细胞增殖能力。

8.根据权利要求1～5、7任一项所述的用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，所述电场为交变电场。

9.根据权利要求8所述的用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，所述交变电场的频率为100kHz～300kHz。

10.根据权利要求8所述的用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，所述交变电场的场强为1Vpeak/cm～3Vpeak/cm。

11.根据权利要求8所述的用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，所述交变电场作用于所述细胞的时间≥72h。

12.根据权利要求1所述的用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，其特征在于，所述方法包括：

将细胞均匀负载于玻片上；

将负载有细胞的玻片放置于细胞培养皿；细胞培养皿对负载于所述玻片上的细胞施加至少一个方向的交变电场；

将负载有细胞的玻片转移至第一容器；

向所述第一容器内加入新鲜培养基；

向所述第一容器内加入CCK-8试剂进行反应；

在所述第一容器中取100μl的上清液加入96孔板中；

于酶标仪450nm处测定每孔吸光度。

13.根据权利要求12所述的用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，其特征在于，所述第一容器为12孔板。

14.根据权利要求1～5、7、9～13任一项所述的用于肿瘤电场作用后细胞增殖检测的方法，所述细胞为贴壁生长的肿瘤细胞。