[发明专利]突变蛋白和羟基酪醇糖苷化衍生物的合成方法在审
| 申请号： | 202310444342.1 | 申请日： | 2023-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN116478950A | 公开（公告）日： | 2023-07-25 |
| 发明（设计）人： | 王丹;周小洁;罗若诗 | 申请（专利权）人： | 重庆大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N1/19;C12N15/81;C12P19/44;C12P19/18;C12R1/865 |
| 代理公司： | 重庆嘉品知识产权代理事务所(普通合伙) 50302 | 代理人： | 覃毅 |
| 地址： | 400030 *** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 突变 蛋白 羟基 糖苷 衍生物 合成 方法 | ||
1.一种糖基转移酶突变蛋白smRrUGT33，其特征在于，氨基酸序列如序列表SEQ IDNO.4所示。
2.权利要求1所述糖基转移酶突变蛋白smRrUGT33的编码基因。
3.根据权利要求2所述的编码基因，其特征在于，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.2所示。
4.权利要求1所述的糖基转移酶突变蛋白smRrUGT33、权利要求2或3所述的编码基因在合成羟基酪醇糖苷化衍生物中的应用。
5.含有权利要求2或3所述编码基因的重组载体、重组菌、转基因细胞系、表达盒或重组病毒。
6.根据权利要求5所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体为将权利要求2或3所述编码基因构建到P426TEF的重组载体。
7.羟基酪醇糖苷化衍生物的合成方法，其特征在于，所述合成方法的具体步骤如下：
a.将BvTyH和DHPAAS的编码基因依次构建到空载体1上，得到重组载体1；
b.将权利要求2或3所述smRrUGT33的编码基因构建到空载体2上，得到重组载体2；
c.再将上述步骤中的重组载体1和重组载体2转化到酿酒酵母中，得到可表达smRrUGT33的重组菌株；
d.步骤c的重组菌株接种至SD-His-Ura培养基中，待OD600达1.8-2.0时，补加葡萄糖和底物L-酪氨酸，再加入糖供体，进行发酵；发酵完毕，收集上清即可。
8.根据权利要求7所述的羟基酪醇糖苷化衍生物的合成方法，其特征在于，所述空载体1为pPIC9K载体；所述空载体2为P426TEF载体。
9.根据权利要求7所述的羟基酪醇糖苷化衍生物的合成方法，其特征在于，所述糖供体选自UDP-葡萄糖、UDP-木糖、UDP-半乳糖、UDP-鼠李糖、UDP-果糖、UDP-甘露糖中的任意一种。
10.根据权利要求7所述的羟基酪醇糖苷化衍生物的合成方法，其特征在于，所述酿酒酵母为酿酒酵母BY4743。
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