[发明专利]一种羽叶扁芒菊组培培养基及其组培方法

说明书

本发明提供了一种羽叶扁芒菊的培养基及其组培方法，包括如下步骤：选择羽叶扁芒菊的腋芽为外植体，表面消毒灭菌后接种于初代培养基中诱导丛生芽，后转接至继代增殖培养基中诱导丛生芽大量繁殖，最后将丛生芽接种于生根培养基中形成生根苗。本发明通过筛选生长调节剂组合种类与配比，优选出不同组培时期的培养基组分，促进各个组培阶段生长状况，缩短育种周期，提高组培生产效率，为今后羽叶扁芒菊野生种质资源保护和后续开发利用提供技术支撑。

技术领域

本发明属于组织培养技术领域，特别涉及一种羽叶扁芒菊的组培培养基及其组培方法。

背景技术

羽叶扁芒菊（ Allardia tomentosa）是菊科扁芒菊属的多年生草本植物，根状茎匍匐，多分枝，具有很强的抗逆性，主要生长于我国西藏海拔4200-5200米的高山碎石山坡中，在印度北部、巴基斯坦、阿富汗及苏联中亚等地区也有分布。

由于羽叶扁芒菊在我国主要分布于西藏高海拔地区，较难采集，且引种后由于与原产地条件相差较大，移栽后不易成活。而目前尚无针对羽叶扁芒菊组织培养技术的相关报道。因此系统地研究适合羽叶扁芒菊快速繁殖的培养基，建立高效稳定的组培扩繁体系，对于羽叶扁芒菊野生种质资源的保存以及进一步的开发利用等具有重要的意义。

发明内容

为解决上述问题，本发明目的在于提供一种羽叶扁芒菊的组培培养基。

本发明的再一目的在于：提供一种羽叶扁芒菊的组培方法，以期在短时间内获得大量的羽叶扁芒菊植株。

本发明目的通过以下方案实现：一种羽叶扁芒菊的组培培养基，所述培养基主要包括了初代培养基、继代增殖培养基以及生根培养基；

初代培养基：以MS为基本培养基，在其中加入浓度为0.2~ 2.0 mg/L 6-BA、0.05~0.1 mg/L NAA、30 g/L蔗糖和7 g/L琼脂；

继代增殖培养基：以MS为基本培养基，在其中加入浓度为0.2~2.0 mg/L 6-BA、0.1~0.2 mg/L NAA、30 g/L蔗糖和7 g/L琼脂；

生根培养基：以1/2 MS为基本培养基，在其中加入 0.1~0.3 mg/LNAA、30 g/L蔗糖和7 g/L琼脂；

作为优选，本发明提供的初代培养基、继代增殖培养基以及生根培养基的pH为5.80~5.90，pH值通过添加盐酸或氢氧化钠进行调节；

优选的，本发明所述初代丛生芽诱导培养基为MS+0.25 mg/L 6-BA+0.2mg/LNAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂；

优选的，本发明所述丛生芽继代增殖培养基为MS+0.25 mg/L 6-BA+0.2mg/LNAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂；

优选的，本发明所述生根培养基为1/2 MS+ 0.3 mg/LNAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂；

本发明还提供了一种羽叶扁芒菊的组培方法，主要包括以下步骤：

（1）选择和处理外植体：选择生长健壮，无病害的羽叶扁芒菊茎段或腋芽为外植体，去除部分叶片，剪切至3~4cm；置于流水下冲洗干净后，对其进行灭菌消毒处理，得到消毒灭菌后的外植体；

（2）将消毒灭菌后的外植体放入无菌纸上吸干表面水分并剪去两端伤口，接种于初代培养基中培养，以得到羽叶扁芒菊无菌苗；

（3）将初代培养中获得的羽叶扁芒菊无菌苗剪切成1.5~2 cm左右，转接到继代增殖培养基中培养，获得大量羽叶扁芒菊植株；

（4）将继代培养中大小一致，生长健壮的羽叶扁芒菊丛生芽植株接种至生根培养基中生根培养，最终获得生根苗。