[发明专利]一种高纯度NK细胞库构建方法

权利要求书

1.用于冻存、复苏NK细胞的试剂盒，所述的试剂盒包括细胞冻存液、NK细胞扩增培养基，其特征在于，所述的NK细胞扩增培养基包括以下组分：

血清替代物、IL-2、IL-15、复合维生素；

优选的，所述的细胞冻存液包括以下组分:

DMSO、右旋糖酐、人血白蛋白、复方电解质溶液；

优选的，所述的复合维生素包含维生素A/视黄醇、维生素B2/维生素B6/维生素B12、维生素C/L-抗坏血酸中一种或者多种，优选的，所述的复合维生素为维生素C和维生素B2的复合物；

优选的，在NK细胞扩增培养基中，所述的血清替代物为CTSTM免疫细胞血清替代物。

优选的，在NK细胞扩增培养基中，血清替代物的浓度为3％-10％、IL-2的浓度为1000-10000IU/mL、IL-15的的浓度为50-2000IU/mL、复合维生素的浓度为0-1000ng/mL，更为优选的，血清替代物的浓度为5％、IL-2的浓度为1000IU/mL、IL-15的的浓度为300IU/mL、复合维生素的浓度为100ng/mL；

优选的，所述的NK细胞扩增培养基的基础培养基选自NK MACS,X-VIVO15,GT-T551H3,cellgrowSCGM,AIM-V，优选的，所述的NK细胞扩增培养基的基础培养基为NKMACS；

优选的，在冻存液中，DMSO的浓度为10％，右旋糖酐的浓度为0-10％，人血白蛋白的浓度为40％-50％，复方电解质溶液的浓度为40％-50％，更为优选的，人血白蛋白的浓度为40％，右旋糖酐的浓度为10％，复方电解质溶液的浓度为40％；

优选的，所述的人血白蛋白可以替换为自体血浆，优选的，在冻存液中，自体血浆的浓度为40％-50％，更为优选的，自体血浆的浓度为40％，

优选的，所述的复方电解质溶液可以替换为氯化钠注射液，优选的，在冻存液中，氯化钠注射液的浓度为40％-50％，更为优选的，氯化钠注射液的浓度为40％。

2.一种保存NK细胞的方法，其特征在于，所述的方法包括：

将待保存的NK细胞与细胞冻存液混合后进行冻存；

其中，所述的细胞冻存液如权利要求1中所定义。

3.一种NK细胞复苏后扩增培养的方法，其特征在于，所述的方法包括：

将待复苏的NK细胞进行解冻，将解冻后的NK细胞与NK细胞扩增培养基混合后进行培养；

其中，所述的NK细胞扩增培养基如权利要求1中所定义。